[发明专利]一种培养金龟子绿僵菌的方法

权利要求书

1.一种培养金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)的方法，包括如下步骤：1)用液体培养基对金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)进行液体发酵培养，将容器内的所有物质记作液体发酵产物；2)将所述液体发酵产物接种于固体发酵培养基，进行固体发酵培养，得到金龟子绿僵菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述液体发酵培养的条件为：温度为28℃，通入空气的量为10L/min/35L所述液体培养基和所述容器内的气压为0.03Mpa。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，液体发酵培养至液体发酵产物呈如下状态：液体发酵产物中有菌丝及液生孢子，液体发酵产物中菌丝体中无液泡，液体发酵产物中无断裂的菌丝。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，液体发酵培养的时间为65小时～72小时，具体为65小时、68小时或72小时。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述液体培养基由玉米粉、豆饼粉、蛋白胨、KH₂PO₄、MgSO₄、KCl、FeSO₄·7H₂O和水组成；所述各组分的配比为：20g玉米粉∶40g豆饼粉∶2.5g蛋白胨∶0.5gKH₂PO₄∶0.5gMgSO₄∶0.5gKCl∶0.01gFeSO₄·7H₂O∶1000ml水。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述固体发酵培养的方式按照如下a阶段、b阶段和c阶段依次进行：

a阶段：在温度为24℃和湿度为95％(体积百分含量)的条件下培养；

b阶段：在温度为28℃和湿度为80％(体积百分含量)的条件下培养；

c阶段：在温度为28℃和湿度为40％(体积百分含量)的条件下培养。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述a阶段的培养时间为2天-3天；所述b阶段的培养时间为2天；所述c阶段的培养时间为2天。

8.根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述接种的量为：使所述液体发酵产物与固体发酵培养基的体积比为20∶80。

9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述固体发酵培养基由甘蔗渣、麸皮、玉米粉、KH₂PO₄、MgSO₄、KCl和水组成；所述各组分的质量份数比为：300-400份甘蔗渣∶150-200份麸皮∶90-150份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶300-400份水；

所述各组分的质量份数比具体为：300份甘蔗渣∶150份麸皮∶150份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶300份水，或350份甘蔗渣∶180份麸皮∶120份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶350份水，或400份甘蔗渣∶200份麸皮∶90份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶400份水。

10.根据权利要求1-9中任一所述的方法，其特征在于：所述麸皮为小麦麸皮；

所述步骤2)中，所述培养过程中包括翻料的步骤；

所述金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)为金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)JF813，ACCC编号为31518。