[发明专利]一种新型链霉菌分泌表达质粒及应用无效
| 申请号： | 201010196933.4 | 申请日： | 2010-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN102002510A | 公开（公告）日： | 2011-04-06 |
| 发明（设计）人： | 洪斌;朱元军;王丽非;杜郁;余腾斐;王松梅 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/76 | 分类号： | C12N15/76;C12N1/21;C12P21/00;C12R1/465 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 程泳 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新型 霉菌 分泌 表达 质粒 应用 | ||
1.一种表达载体，其为环状，且可操作地连接有：
源于pSGL1的复制子序列：其由SEQ ID NO：1中第5086-7372位所示序列的互补序列构成；
大肠杆菌复制起始区ori序列：其由SEQ ID NO：1中第2497-3164位所示序列构成；
氨苄青霉素抗性基因bla序列：其由SEQ ID NO：1中第3315-4172位所示序列的互补序列构成；
多克隆酶切位点序列：其由SEQ ID NO：1中第1452-1481位所示序列构成；
阿普霉素抗性基因aac(3)IV序列：其由SEQ ID NO：1中第204-980位所示序列的构成；
源于链霉菌接合转移的必需区oriT序列：其由SEQ ID NO：1中第8602-8713位所示序列构成；
cagAp和ermE*p串联的强启动子序列：其由SEQ ID NO：1中第1581-2057位所示序列的互补序列构成；和
信号肽序列：其由SEQ ID NO：1中第1482-第1580位所示序列的互补序列构成或者由SEQ ID NO：1中第1482-第1580位所示序列中第1572位至第1574位的CTG替换为TTA的互补序列构成。
2.权利要求1的表达载体，其为环状，且由SEQ ID NO：1所示序列构成。
3.权利要求1或者2的表达载体，其中还可操作地插入有表达外源蛋白的基因。
4.权利要求3的表达载体，其中的外源蛋白选自细胞因子、肽类生物药物和功能蛋白。
5.权利要求4的表达载体，其中的外源蛋白是白细胞介素6。
6.宿主细胞，其含有权利要求1或2所述的表达载体。
7.权利要求6的宿主细胞，其为链霉菌。
8.权利要求1或2所述的表达载体在链霉菌中表达外源蛋白的用途。
9.权利要求8的用途，其中所述的外源蛋白选自细胞因子、肽类生物药物和功能蛋白，优选白细胞介素6。
10.权利要求8的用途，其中的表达为分泌型表达。
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