[发明专利]紫背天葵叶片组织培养的方法及其专用培养基无效
申请号: | 201010197851.1 | 申请日: | 2010-06-03 |
公开(公告)号: | CN101836593A | 公开(公告)日: | 2010-09-22 |
发明(设计)人: | 郭仰东;刘莉莎;温常龙;赵永钦;赵立群;王玉珏;程琳 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 紫背天葵 叶片 组织培养 方法 及其 专用 培养基 | ||
1.一种紫背天葵叶片的愈伤组织诱导培养基,是在MS基本培养液中添加如下物质得到的固体培养基:2,4-D、6-BA、碳源和凝胶剂;
所述愈伤组织诱导培养基中2,4-D的终浓度是1-3mg/L、6-BA终浓度是0.2-1mg/L;所述MS基本培养液的溶剂是水、溶质如表1所示。
2.根据权利要求2所述的愈伤组织诱导培养基,其特征在于:所述愈伤组织诱导培养基中2,4-D的终浓度是2mg/L,6-BA的终浓度是0.5mg/L。
3.根据权利要求1或2所述的愈伤组织诱导培养基,其特征在于:所述愈伤组织诱导培养基中凝胶剂是琼脂、卡拉胶或Gelrite,优选是琼脂;所述琼脂的终浓度是7-9g/L;
所述愈伤组织诱导培养基中碳源是葡萄糖、麦芽糖或蔗糖,优选为蔗糖;所述蔗糖的终浓度是20-40g/L。
4.一种生产紫背天葵再生苗的方法,包括以下步骤:
1)将紫背天葵叶片置于权利要求1-3中任一所述的愈伤组织诱导培养基上培养,诱导得到愈伤组织;
2)将步骤1)得到的愈伤组织在分化培养基上培养,获得丛生芽;
3)将步骤2)中获得的丛生芽进行诱导生根得到再生苗。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:步骤2)中,所述分化培养基是在MS基本培养液中添加噻苯隆、AgNO3、碳源和凝胶剂得到的固体培养基;其中噻苯隆的终浓度为0.2-0.8mg/L,AgNO3的终浓度为2-6mg/L;所述MS基本培养液的溶剂是水、溶质如表1所示。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述分化培养基中噻苯隆的终浓度为0.5mg/L,AgNO3的终浓度为4mg/L。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于:所述分化培养基中,所述凝胶剂是琼脂、卡拉胶或Gelrite,优选为琼脂,所述琼脂的终浓度为7-9g/L;所述碳源是葡萄糖、麦芽糖或蔗糖,优选为蔗糖,所述蔗糖的终浓度为20-40g/L。
8.根据权利要求4-7中任一所述的方法,其特征在于:所述方法在步骤2)和步骤3)之间还包括一丛生芽的伸长培养,所述伸长培养是将步骤2)得到的丛生芽接种到伸长培养基上培养,得到伸长的丛生芽。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:所述伸长培养基是在MS基本培养液中添加噻苯隆、AgNO3、碳源和凝胶剂得到的固体培养基;其中噻苯隆的终浓度为0.2mg/L,AgNO3的终浓度为4mg/L;
所述碳源是葡萄糖、麦芽糖或蔗糖,优选为蔗糖,所述蔗糖的终浓度为20-40g/L;
所述凝胶剂是琼脂、卡拉胶或Gelrite,优选为琼脂,所述琼脂的终浓度为7-9g/L;
所述MS基本培养液的溶剂是水、溶质如表1所示。
10.根据权利要求4-9中任一所述的方法,其特征在于:所述诱导生根是在生根培养基中进行的,所述生根培养基是在MS基本培养液中添加碳源和凝胶剂得到的固体培养基;所述碳源是葡萄糖、麦芽糖或蔗糖,优选为蔗糖,所述蔗糖的终浓度为20-40g/L;所述凝胶剂是琼脂、卡拉胶或Gelrite,优选为琼脂,所述琼脂的终浓度为7-9g/L;所述MS基本培养液的溶剂是水、溶质如表1所示。
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