[发明专利]人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒及其制备方法和用途

权利要求书

1.人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒，它包括盒体，在盒体内设有反应板(1)和阳性对照品(2)，其特征是：在反应板(1)中设有若干反应孔(3)，所述反应板(1)包括荧光定量PCR标准曲线反应板(11)和荧光定量PCR待测样品反应板(12)；在荧光定量PCR标准曲线反应板(11)、荧光定量PCR待测样品反应板(12)中设有目的基因TRPC1～TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液，所述目的基因TRPC1～TRPC7反应混合液包括TRPC1～TRPC7基因引物序列、SYBR荧光染料、DNA聚合酶和反应离子缓冲液，所述内参基因IP08反应混合液包括IP08基因引物序列、SYBR荧光染料、DNA聚合酶和反应离子缓冲液；所述目的基因TRPC1～TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液设置在反应孔(3)中。

2.根据权利要求1所述的人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒，其特征是：

1)所述TRPC1基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：1所示；

2)所述TRPC2基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：2所示；

3)所述TRPC3基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：3所示；

4)所述TRPC4基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：4所示；

5)所述TRPC5基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：5所示；

6)所述TRPC6基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：6所示；

7)所述TRPC7基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：7所示；

8)所述I P08基因引物序列的核苷酸序列如序列表SEQ ID№：8所示。

3.根据权利要求1或2所述的人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒，其特征是：所述荧光定量PCR标准曲线反应板(11)、荧光定量PCR待测样品反应板(12)各设有96个反应孔(3)，构成96孔板。

4.人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)制备盒体和安置于盒体内的荧光定量PCR标准曲线反应板(11)和荧光定量PCR待测样品反应板(12)，在所述的荧光定量PCR标准曲线反应板(11)和荧光定量PCR待测样品反应板(12)中按区域设置目的基因TRPC1～TRPC7和内参基因IP08的反应孔(3)，每个样品设置一个重复孔；每个基因设置两个无模板阴性对照-NTC；

2)设计目的基因TRPC1～TRPC7及内参基因IP08引物，测定所述引物的效率与特异性；

3)将所测引物分别与SYBR荧光染料、DNA聚合酶和反应离子缓冲液混合，分别构成目的基因TRPC1～TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液；

4)将目的基因TRPC1～TRPC7反应混合液和内参基因IP08反应混合液分别加于在前述对应反应孔中，构成目的基因TRPC1～TRPC7及内参基因IP08荧光定量PCR各反应板；

5)制备人脑组织cDNA为.TRPC1～TRPG7基因阳性对照样品，检测时取该样品按2倍倍比稀释成5个浓度梯度后加于标准曲线反应板(11)的反应孔(3)中，构成梯度反应孔。

5.人瞬时受体电位通道蛋白荧光定量PCR检测试剂盒的用途，其特征是：用于人类TRPC基因相关良恶性疾病的分析研究。