[发明专利]HPV58 L1基因及载体、菌株和表达方法

权利要求书

1.一种HPV58L1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.根据权利要求1所述的HPV58L1基因，其中该基因表达的蛋白能够 在毕赤酵母体内自组装成病毒样颗粒。

3.一种在毕赤酵母中表达HPV58L1基因的方法，包括下述步骤：

(1)将权利要求1所述的HPV58L1基因克隆入表达载体中；

(2)将步骤(1)所得的表达载体转化至毕赤酵母菌株中；

(3)使用抗生素对步骤(2)所得的转化菌株进行筛选，获得生长情况最好 的一个或多个菌株；

(4)通过测试HPV58L1基因的表达量对步骤(3)所得的菌株进行进一步 筛选，获得表达量最高的一个或多个菌株；

(5)使用步骤(4)所得的菌株进行表达，获得HPV58L1蛋白。

4.根据权利要求3的方法，其中步骤(1)中所述的表达载体为pPICZαB载 体，并且步骤(3)中使用的抗生素为零霉素；和/或其中步骤(2)中使用的 毕赤酵母菌株为毕赤酵母X-33菌株；和/或其中步骤(4)中测试HPV58 L1基因的表达量的操作是通过Western blot方法进行的；和/或其中步 骤(5)中的表达步骤为在发酵罐中进行的发酵步骤。

5.一种含有权利要求1所述的基因的表达载体。

6.根据权利要求5的表达载体，所述表达载体为适于在酵母中表达的载体。

7.根据权利要求6的表达载体，其中权利要求1所述的基因被插入至 pPICZαB载体中。

8.根据权利要求7的载体，其中权利要求1所述的基因被插入至pPICZαB 载体中的BstBI和KpnI酶切位点之间。

9.含有权利要求1所述的基因的毕赤酵母菌株。

10.根据权利要求9所述的毕赤酵母菌株，含有权利要求5-8之一所述的表 达载体。