[发明专利]二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于由样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸样垫和PVC支撑板组成，样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸样垫依次粘贴在PVC支撑板上，胶体金垫为胶体金标记的二亚甲基双氧安非他明单克隆抗体玻璃纤维或无纺布，硝酸纤维素膜上依次包被了二亚甲基双氧安非他明偶联抗原作为检测线(T线)，羊抗鼠IgG抗体作为质控线(C线)。

2.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的样品垫为玻璃纤维或无纺布，吸样垫为吸水滤纸。

3.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的二亚甲基双氧安非他明偶联抗原为二亚甲基双氧安非他明与牛血清蛋白的偶联物，二亚甲基双氧安非他明单克隆抗体由二亚甲基双氧安非他明偶联抗原免疫获得。

4.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的胶体金是由氯金酸(HAuCl₄)在还原剂枸橼酸三钠作用下制成大小为20-40nm的胶体金颗粒。

5.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的胶体金垫的制备方法为：取颗粒大小为20-40nm的胶体金溶液6ml，用0.1mol/L K₂CO₃将胶体金溶液的pH值调至8.5，室温放置10分钟；逐滴加入蛋白浓度为4.8mg/ml的二亚甲基双氧安非他明单抗0.03ml，混合均匀，室温放置30分钟；加入0.075ml 10％牛血清蛋白(BSA)溶液，混合均匀，室温放置10分钟；11000转离心30分钟，仔细吸取上清液，弃去，用含5％蔗糖的0.002mol/L pH 8.5的硼酸盐缓冲液6mL复溶，重复2次；最后用硼酸盐缓冲液溶解至3mL，得到二亚甲基双氧安非他明单抗-胶体金标记物；将二亚甲基双氧安非他明单抗-胶体金标记物按1mL铺56cm²的比例均匀铺在无纺布上，再置干燥间，在温度38℃，湿度小于30％的条件下干燥2-4小时，制成胶体金垫。

6.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的硝酸纤维素膜上的两条线的包被方法为：设定划膜仪涂覆参数1μL/cm，分别用微量进样器取0.2mL浓度为1.0mg/ml的二亚甲基双氧安非他明偶联抗原、浓度为0.8mg/ml的羊抗鼠IgG，按顺序接到划膜仪的A、B管道接口。将贴有硝酸纤维素膜的PVC板置于划膜仪的往复运动平台上，开启划膜仪，在硝酸纤维素膜上涂覆二亚甲基双氧安非他明偶联抗原(T线)、羊抗鼠IgG(C线)。划线后将硝酸纤维素膜烘箱中，温度38℃，干燥24小时，备用。

7.一种权利要求1所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒及其制备方法，其特征在于所述的二亚甲基双氧安非他明检测试剂盒的组装方法为：将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸样垫由一端依次黏附在PVC支撑板上，即可形成检测二亚甲基双氧安非他明的试剂条，试剂条也可以装入塑料卡中形成卡型包装。