[发明专利]虎源性、豹源性DNA的PCR检测引物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.虎源性、豹源性DNA的PCR检测引物，其特征在于：

引物序列：

正向引物(SEQ ID NO.1)：5’GAATATACTATGGCTCCTACAC 3’，

反向引物(SEQ ID NO.2)：5’GGTTGGCGGGGATGTAGTTA 3’。

2.虎源性、豹源性DNA的PCR检测试剂盒，其特征在于该试剂盒中包括一种检测溶液，该检测溶液中含10×PCR缓冲液、10μmol/L正向引物、10μmol/L反向引物、10m mol/L dNTP、5U/μL Taq DNA聚合酶；

其中，所述的正向引物序列为SEQ ID NO.1，反向引物序列为SEQ ID NO.2。

3.虎源性、豹源性DNA的PCR检测方法，其特征在于使用权利要求2所述的试剂盒，包括如下步骤：

①提取待测样品DNA，得到模板DNA溶液；

②反应体系：取1μl步骤①制得的模板DNA溶液，加入上述试剂盒中的溶液6.2μl，再加入灭菌超纯水至总体积25μl；将以上各组分加入至0.2mL PCR反应管中，混匀，5000r/min，离心10s；

③步骤②的反应体系按下述条件进行实时荧光PCR检测：

预变性：94℃，3min；

进入循环：94℃变性60s，66℃退火60s，72℃延伸60s，35次循环；

终止延伸：72℃，7min；

4℃保存反应产物。