[发明专利]提供作物广谱病毒抗性的包含木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶基因的基因转移载体及其应用

权利要求书

1.一种用于提供植物对病毒的抗性的重组载体，其包含控制序列以及与该控制序列可操纵连接的木瓜环斑病毒(PRSV)辅助组分蛋白酶基因(HC-Pro基因)的编码序列片段。

2.如权利要求1所述的重组载体，其包含具有所述控制序列的二元载体以及构建于该二元载体中的所述编码序列片段。

3.如权利要求1所述的重组载体，其中所述编码序列片段具有与SEQID NO：5所示序列具有85％以上的同源性的核苷酸序列。

4.如权利要求1所述的重组载体，其中所述编码序列片段具有与SEQID NO：6所示序列具有85％以上的同源性的核苷酸序列。

5.如权利要求1所述的重组载体，其中所述编码序列片段具有与SEQID NO：7所示序列具有85％以上的同源性的核苷酸序列。

6.如权利要求1至5任一项所述的重组载体，其中所述木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶基因的编码序列片段位于所述控制序列下游，且所述木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶基因的编码序列片段的5’端具有至少一个终止密码子。

7.如权利要求3所述的重组载体，其为pBI-519HCF，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2010112。

8.如权利要求3所述的重组载体，其为pBI-519HCN或pBI-519HCC。

9.一种重组微生物，其是由将如权利要求1至8中任一项所述的重组载体转化微生物中所制得的。

10.如权利要求9所述的重组微生物，其中所述微生物为去毒(disarmed)的根瘤农杆菌。

11.一种用于使植物对病毒具有抗性的方法，其包含下列步骤：

将如权利要求1至8中任一项所述的重组载体转移至植物内，以使该植物非翻译性表达该重组载体的木瓜环斑病毒的辅助组分蛋白酶基因的编码序列片段的转录物，但不表达辅助组分蛋白酶，从而使该植物产生对于病毒的抗性。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述植物选自于下列植物所构成的组：葫芦科(Cucurbitaceae)以及番木瓜科(Caricaceae)植物。

13.如权利要求10所述的方法，其中所述将如权利要求1至8中任一项所述的重组载体转移至植物内的步骤包括：

将该重组载体导入农杆菌中，以取得重组农杆菌；以及以该重组农杆菌转染所述植物，以取得带有该编码序列片段的植物。

14.一种木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶的全长基因或其基因片段用于制造对病毒具有抗性的植物的用途，其中该木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶的全长基因具有如SEQ ID NO：8所示序列。

15.如权利要求14所述的用途，其包括将含有该木瓜环斑病毒辅助组分蛋白酶的全长基因或其基因片段的非翻译性构建体导入至植物。

16.一种重组植物细胞，其基因组中插入有选自于下列组中的核酸分子：具有与SEQ ID NO：5所示序列具有85％以上同源性的核酸序列、与SEQ IDNO：6所示序列具有85％以上同源性的核酸序列以及与SEQ ID NO：7所示序列具有85％以上同源性的核酸序列的核酸分子。