[发明专利]一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法及其低温连续搅拌超滤装置

说明书

技术领域

本发明涉及制药领域，具体地，涉及一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法及其低温连续搅拌超滤装置。

背景技术

大蒜(Alliium sativun L.)及其制剂已列入美国、欧盟药典。确认蒜氨酸(Alliin)及大蒜辣素(Allicin)为主要功效成分。但是目前国内外上市的大蒜制剂蒜氨酸或大蒜辣素的含量很低。研发安全、有效、质量可控的大蒜高效新制剂成为各国药学家的研究热点。

1、蒜氨酸(Alliin)化学名：S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜(S-Allyl-L-cysteine)。熔点：163-165℃(分解、炭化)，[α]D＝+60o，白色结粉末，几乎无臭。

C₆H₁₁NO₃S＝177.22

依据发明专利：从鲜蒜中制备蒜氨酸的方法(ZL 001012444)及从鲜蒜中制备蒜氨酸的生产工艺(ZL 03100420·2)：符合药典规定的大蒜，经脱皮、纯水洗净，微波照射5-10分钟或沸水煮沸5-10分钟使蒜酶灭活。打浆、纯水或5-70％乙醇提取、浓缩、精滤、离子交换柱吸附、氨水洗脱、浓缩、喷雾干燥、重结晶等步骤，制备蒜氨酸原料药。HPLC测定含量≥90％。

2、蒜酶(Alliinase，EC 4.4.1.4)又名蒜氨酸裂解酶、烯丙基半胱氨酸亚砜酶(Alliin lyase，S-allyl-L-cysteine sulfoxide lyase)。属二聚体糖蛋白，两个亚基分子量均为51.5KDa。结晶呈黄色，无臭，等电点pH：4.9。

依据发明专利：从鲜蒜中制备蒜酶的生产工艺(ZL 03100419·9)：在低温车间(0-3℃)，符合药典规定的大蒜，经脱皮、纯水洗净、胶体磨破壁打浆、缓冲保护液提取蒜酶，经(NH4)2SO4或PEG-4000～8000沉淀蒜酶，连续式低温管式离心机收集沉淀，缓冲保护液复溶。两组超滤装置除去大分子和小分子，冷冻干燥，得到蒜酶原料药。以蒜氨酸为底物，经HPLC测定，蒜酶活力≥1000IU/g。

3、大蒜辣素(Alliicin)化学名：二烯丙基硫代亚磺酸酯(2-propene-1-sulfinothioic acid S-2-propenyl ester)。常温下为淡黄色易挥发粘稠液体，有浓烈气味。密度：1.112g/cm³。熔点：25℃(分解)，微溶于水。在空气中数小时即分解变质。

2[C₆H₁₁NO₃S]＝2×177.2＝354.4     [C₆H₁₀OS₂]＝162.3

两分子蒜氨酸被蒜酶催化裂解生成一分子大蒜辣素。即354.4克蒜氨酸(2[C₆H₁₁NO₃S]＝2×177.2＝354)可生成大蒜辣素162.3克([C₆H₁₀OS₂]＝162)。加入蒜氨酸纯度“C”及反应系数(0.9)。得到以下关系式：

发明内容

本发明的目的在于，针对上述问题，提出一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法，以实现配方合理、制备简单、纯度高、性能稳定的优点。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法，分两步：

第一步，提取大蒜辣素，步骤为：

(1)、在充满氩气或高纯氮的容器中加入脱氧纯水和蒜酶，其中脱氧纯水∶蒜酶＝1000～2000ml∶35.4g，此比例可按照产量和浓度的不同要求，加以扩大或缩小。充分搅拌使蒜酶充分溶解，调节水浴温度至25-35℃，控制pH值在6.5-8.5范围内；

(2)、配制蒜氨酸溶液，其中蒜氨酸∶脱氧纯水＝35.4∶500～1000ml，将蒜氨酸溶液缓慢滴加入上述容器，其中蒜氨酸∶蒜酶＝1mg∶1～2IU，充分搅拌，并连续通入氩气或高纯氮使容器内充满高纯氮或氩气；；

(3)、滴加完毕后继续搅拌，反应总时间20～40分钟。得到含大蒜辣素等成分的酶解反应溶液，立即用冰水置换水浴中的温水，水浴温度降至0℃(有过量冰块)，最后利用1000～5000D超滤膜除去蒜酶得到大蒜辣素水溶液。

第二步，在洁净生物安全柜(无菌)环境下，将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至0-4℃的溶剂稀释得到大蒜辣素溶液；