[发明专利]一种7-木糖紫杉烷糖基水解酶、其基因的核苷酸序列及其应用有效
申请号: | 201010209089.4 | 申请日: | 2010-06-25 |
公开(公告)号: | CN102296053A | 公开(公告)日: | 2011-12-28 |
发明(设计)人: | 朱平;程海立;赵瑞玉;程克棣;何惠霞;孟超;朱慧新 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药物研究所 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12P17/02 |
代理公司: | 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138 | 代理人: | 何文彬 |
地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫杉 烷糖基 水解 基因 核苷酸 序列 及其 应用 | ||
1.一种7-木糖紫杉醇糖基水解酶,其特征在于,所述7-木糖紫杉醇糖基水解酶的氨基酸序列包括SEQ ID NO:2所示序列的至少8个氨基酸序列,优选包括SEQ IDNO:2所示序列的至少15个氨基酸序列,更优选包括SEQ ID NO:2所示序列的至少240个氨基酸序列,进一步优选包括SEQ ID NO:2所示序列的至少321氨基酸序列,更优选包括SEQ ID NO:2所示序列的至少481氨基酸序列。
2.一种编码权利要求1所述7-木糖紫杉醇糖基水解酶的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸序列,其特征在于,所述的核苷酸序列具有SEQ IDNO:1所示的核苷酸序列的至少24个核苷酸,优选具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的至少45个核苷酸,更优选包括SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的至少720个核苷酸,进一步优选具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的至少963个核苷酸,更优选包括SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的至少1443个核苷酸。
4.一种含有权利要求2所述核苷酸序列的表达载体。
5.一种含有权利要求4所述表达载体的宿主细胞。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞选自细菌、放线菌、丝状真菌、酵母菌、植物细胞、动物细胞,其中,细菌选自大肠杆菌,放线菌选自链霉菌,丝状真菌选自担子菌、丝状子囊菌,酵母菌选自毕赤酵母、酿酒酵母、裂殖酵母,动物细胞选自昆虫细胞。
7.根据权利要求1所述的7-木糖紫杉醇糖基水解酶或含有7-木糖紫杉醇糖基水解酶的宿主细胞在水解去除木糖基和/或水解去除葡萄糖基方面的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述7-木糖紫杉醇糖基水解酶水解去除木糖基时底物包括7-木糖紫杉烷、7-木糖-10-去乙酰紫杉醇、7-木糖-10-去乙酰三尖杉宁碱、7-木糖-10-去乙酰巴卡亭III、7-木糖-10-去乙酰紫杉醇C、7-木糖紫杉醇、7-木糖三尖杉宁碱、7-木糖巴卡亭III、7-木糖紫杉醇C。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的7-木糖紫杉醇糖基水解酶水解去除木糖基后得到的产物包括7-羟基紫杉烷,其中制备的7-羟基紫杉烷,包括但不限于10-去乙酰紫杉醇、10-去乙酰三尖杉宁碱、10-去乙酰巴卡亭III、10-去乙酰紫杉醇C、紫杉醇、三尖杉宁碱、巴卡亭III、紫杉醇C。
10.根据权利要求8、9任-所述的应用,其特征在于,所述的7-木糖紫杉醇糖基水解酶在以7-糖基紫杉烷为原料制备7-羟基紫杉烷时的应用。
11.根据权利要求10所述的应用,其特征在于,所述的7-糖基紫杉烷原料选自带有木糖基的紫杉烷类的混合物。
12.根据权利要求11所述的应用,其特征在于,所述的紫杉烷类的混合物选自紫杉属植物组织、植物细胞培养物或微生物细胞培养物。
13.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的的7-木糖紫杉醇糖基水解酶在进行水解反应时的溶剂选自水、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。
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