[发明专利]一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体及其构建方法

权利要求书

1.一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体，其特征在于：所述表达载体含有Cre基因表达盒、选择标记基因表达盒以及驱动目的基因的启动子、目的基因的终止子和供目的基因插入的多克隆位点；所述Cre基因的碱基序列如SEQID NO：1所示；所述Cre基因表达盒和选择标记基因表达盒位于两个同向的loxP位点之间。

2.根据权利要求1所述的一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体，其特征在于所述Cre基因表达盒由来自大豆的热激启动子hsp、Cre基因和终止子组成。

3.根据权利要求1所述的一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体，其特征在于：所述驱动目的基因的启动子为Super启动子、35S启动子、e35S启动子或ubiquitin启动子。

4.根据权利要求1所述的一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体，其特征在于：所述选择标记基因为hptII基因、nptII基因或bar基因。

5.根据权利要求1所述的一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体，其特征在于：所述表达载体为pHIMES-SuB、pHIMES-SuK、pHIMES-SuH、pHIMES-35B、pHIMES-35K、pHIMES-35H、pHIMES-e35B、pHIMES-e35K、pHIMES-e35H、pHIMES-UbB、pHIMES-UbK或pHIMES-UbH。

6.一种可高效删除转基因植物选择标记基因表达载体的构建方法，包括以下步骤：

1)对Cre基因进行改造，在Cre基因的第302位碱基G和第303位碱基G之间插入有碱基序列如SEQ ID NO：2所示的蓖麻过氧化氢酶基因的内含子序列；

2)构建Cre基因表达盒；

3)将Cre基因表达盒、选择标记基因表达盒以及驱动目的基因的启动子、目的基因的终止子和供目的基因插入的多克隆位点克隆至同一载体，使Cre基因表达盒和选择标记基因表达盒位于两个同向的loxP位点之间，得到一种可高效删除转基因植物选择标记基因的表达载体。

7.根据权利要求6所述的一种可高效删除转基因植物选择标记基因表达载体的构建方法，其特征在于：所述Cre基因表达盒由来自大豆的热激启动子hsp、Cre基因和终止子组成。

8.权利要求1所述可高效删除转基因植物选择标记基因表达载体在转基因植物培育中的应用。