[发明专利]一种合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于海产品加工技术领域，具体涉及一种合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的制备方法。

背景技术

合浦珠母贝，属珍珠贝科珠母贝属，是世界上生产养殖珍珠的主要贝种。我国海南、广东、广西等省马氏珠母贝资源丰富。自六十年代中期我国合浦珠母贝人工育苗取得成功并大批量生产之后，合浦珠母贝养殖业得到快速发展，养殖产量从1981年14.5公斤增到2009年的10000公斤。目前海南有海水珍珠养殖场1000多个，出产的珍珠占全国海水珍珠总产量的30～40％。合浦珠母贝开珠后产生大量的贝肉，合浦珠母贝肉富含蛋白质、脂肪含量低，营养价值很高，目前只有少量加工为珍珠贝肉干，产品形式单一，高值化加工几乎没有。如何合理高值化利用珍珠贝肉资源，是合浦珠母贝养殖产业急需解决的问题。

随着现代社会的发展，生存环境的恶化以及社会压力的加大使现代人的健康受到严重的威胁，自由基引起机体损伤变性，导致机体各种疾病产生，已经引起人们强烈的重视。抗氧化剂的消费量越来越大，低价、高效、低毒的天然食品抗氧化剂的开发成为研究热点，其中以分子量小、易吸收、活性强，能有效地清除体内过剩的活性氧自由基，保护细胞和线粒体的正常结构和功能，防止脂质过氧化的发生等研究为主。天然抗氧化剂在医药、化妆品、保健品和食品与饲料添加剂等方面应用前景广阔，筛选具有强抗氧化活性的天然资源已成为食品科学、生物学、医学等研究的新趋势。目前关于合浦珠母贝贝肉抗氧化寡肽的制备工艺方面的研究较少，还存在很大的开发空间。

发明内容

本发明的目的是提供一种合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的制备方法，该方法操作简单安全环保，使合浦珠母贝开珠后的贝肉得到高值化利用，可提高生产企业的经济效益。

本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的：一种合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的制备方法，含以下步骤：

(1)冷匀浆：选取贝肉置于预冷水中匀浆后得贝肉匀浆液；

(2)超声波复合酶解处理：在贝肉匀浆液中加入碱性蛋白酶，混匀，将上述贝肉匀浆液和碱性蛋白酶的混合液置于超声仪器中，调节频率为35kHz、功率为280～360W，并调节温度为45～65℃进行酶解50～70min；

(3)进一步酶解：将超声波复合酶解后的贝肉匀浆液置于45～60℃的水浴中进行继续恒温酶解0.5～2h，酶解完毕进行灭酶处理、冷却后离心分离得含合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的上清液；

(4)膜分离和纯化处理：将含合浦珠母贝肉抗氧化寡肽的上清液依次采用截留分子量为5～10kDa和1kDa的超滤膜进行逐步分离，收集滤液，即得到合浦珠母贝肉抗氧化寡肽液，经纯化处理得合浦珠母贝肉抗氧化寡肽粉末。

上述制备方法中：

步骤(1)中所述的贝肉需经预处理，所述的预处理过程为：选取冷冻贝肉解冻或鲜贝肉，除去内脏，用清水清洗2～3次，沥水5min以上。

步骤(1)中所述的贝肉与预冷水的重量体积比为1∶0.5～1.0。

步骤(1)中预冷水的温度为0～10℃，匀浆时间为2～5min。

步骤(2)中所述的碱性蛋白酶的添加量为每克贝肉匀浆液中加入1800～2500U。

步骤(3)中灭酶的温度为100℃，灭酶的时间为5～10min。

步骤(3)中离心分离的过程是：调节冷冻离心机的转速为10000～15000r/min，在0～4℃下离心15～25min。

步骤(4)中超滤膜分离的条件是：操作压力为3～4bar，温度为3～10℃。

优选的，步骤(4)中的纯化处理过程为：将所得的合浦珠母贝肉抗氧化寡肽液经冷冻干燥得合浦珠母贝肉抗氧化寡肽粉。

优选的，步骤(4)中的纯化处理过程为：将所得的合浦珠母贝肉抗氧化寡肽液采用无水乙醇脱水后再经减压浓缩得合浦珠母贝肉抗氧化寡肽粉。

本发明与现有技术相比，具有以下的优点：

(1)本发明通过超声波复合酶解及超滤技术相结合的集成技术，将合浦珠母贝肉通过碱性蛋白酶进行酶解，利用超声波技术具有波动和能量的双重属性，一是空化现象，即在液体介质中表现为泡的形成和破裂及伴随的能量释放，二是介质和容器也可以通过声的吸收产生共振性质的二级效应，所以在超声波的辅助作用下促进碱性蛋白酶对合浦珠母贝肉进行水解，通过控制酶解的时间、温度、加酶量、料水比例，获取具有高抗氧化活性的寡肽。不仅对南海主要养殖珍珠贝-合浦珠母贝开珠后大量的贝肉进行高值化利用，而且得到具有功能保健作用的抗氧化寡肽，可广泛应用于食品、化妆品等轻工行业及医药保健，促进海水养殖珍珠产业的可持续发展，具有重要的经济意义和社会意义。