[发明专利]一种富含CTP、钙离子和钙调蛋白的复合物水溶液的生产工艺

权利要求书

1.一种富含CTP、钙离子和钙调蛋白的复合物水溶液的生产工艺

，它是将瘦牛肉、鲤鱼和天门冬经四级发酵，再经过滤，灭菌、消毒处理而得，其特征在于：

①、一级发酵处理：选瘦牛肉和鲤鱼为主要原料，天然大豆根瘤类菌体为菌种，高温灭菌大豆浆作培养基；

将大豆根瘤类菌体的根瘤颗粒，经清洗、外膜消毒，粉碎后制成悬液，按1:10的比例将悬液注入大豆浆培养液中，在PH5、30℃条件下发酵4小时，制成一级菌种；从一级菌种开始，在同样条件下，同样按1:10的比例加上高温灭菌大豆浆，再重复做第二次、第三次，制成三级菌种；将30％的瘦牛肉浆与70％的带皮、带鳞甲鲤鱼浆制成一份混合肉浆，在高温高压条件下，作灭菌、变性处理，注入等量的大豆根瘤菌三级菌种，每公斤加入20克富含动植物蛋白酶浆液，在PH5、30℃条件下发酵12小时，然后高温高压灭活20分钟，冷却待用；

②、二级发酵处理：将畜、禽十二指肠、小肠、经清洗、外部消毒后，提取肠膜和肠液制成悬液，即得畜、禽肠腺菌酶混合悬液，再按上述大豆根瘤类菌体悬液制备三级菌种的同样方法，制得畜、禽肠腺菌酶混合三级菌种；

按未经煮熟无杂菌污染的大豆浆1份:经高温灭菌的带皮、带鳞甲的鲤鱼肉浆3份:经高温灭菌的天门冬浆2份的比例，制成混合培养基，倒入经高温灭菌后冷却的一级发酵物中；

再将畜、禽肠腺菌酶混合三级菌种按0.5:1的比例注入高温灭菌后冷却的混合肉浆一级发酵物中,再按每公斤用10毫克的比例加入VB₆，每公斤用2毫克的比例加入VB₂，每公斤用20克的比例加入富含动植物蛋白酶浆液，在PH5.6、温度30℃的条件下发酵6个小时；

③、三级发酵处理：将未经煮熟的无杂菌污染的大豆浆1份:将未经煮熟无杂菌污染的带皮、带鳞甲的鲤鱼肉浆3份:未经煮熟的无杂菌污染的天门冬浆1份:未经煮熟无杂菌污染的瘦牛肉浆一份，制成混合培养基；将此混合培养基6份与二级发酵物18份混合，并按每公斤的量加入2毫克VB₂，按每公斤的量加入20克富含动植物蛋白酶浆液，再加入10％含量为10×10⁶个/克的高浓度大肠杆菌菌液,及原料量5％的高温灭菌黄芪浆，在PH5、37℃条件下发酵1小时，发酵的同时充入1个小时的氮气和二氧化碳气体，然后在不充上述气体的情况下，继续发酵5小时，按着在上述三级混合发酵液中加入10％的富含PRPP的水溶液，10％富含尿嘧啶和胞嘧啶的水溶液，再加入原料量5％的高温灭菌黄芪浆，并按每公斤的量加入8毫克VB₂在PH6、37℃条件下发酵1个半小时，发酵的同时充入1个半小时的氧气，然后在不充氧气的情况下再继续发酵1个半小时；

④、四级发酵处理：按三级发酵物中瘦牛肉浆的量加入比例为3:7的未经煮熟无杂菌污染的瘦牛肉和带皮、带鳞甲鲤鱼肉混合肉浆；再按10％的比例加入含量为10×10⁶个/克的大肠杆菌菌液，再将0.14％畜、禽肠腺菌酶混合悬液加入混合发酵物中，再按发酵物每公斤的量加入10毫克VB₆，每公斤的量加入20克富含动植物蛋白酶浆液，再加入原料量5％的高温灭菌黄芪浆，在PH5、37℃条件下发酵1个半小时，发酵的同时充入1个半小时氮气；然后在不充氮气的情况下继续发酵4个半小时；接着再升温至45℃发酵3个小时，然后将全部四级发酵物放入冰柜中冷冻36个小时，将畜、禽肠腺菌酶混合悬液中的酵母菌在发酵中扩繁后的酵母菌群，在低温条件下继续分解原料发酵水解后残留的淀粉、多糖，转变为单糖；最后将全部发酵物在高温高压条件下加热15分钟，杀灭全部微生物，冷却后过滤去渣，再在126.8℃、1.4公斤/厘米²的高温高压条件下,破坏掉微生物繁殖中所产生的全部外毒素与内毒素,即得富含CTP和Ca²⁺·CaM水溶液的成品。

2.根据权利要求1所述一种富含CTP、钙离子和钙调蛋白的复合物水溶液的生产工艺,其特征在于：高温高压条件为:温度＞80℃;压力＞0.5公斤/厘米²。

3.根据权利要求1所述一种富含CTP、钙离子和钙调蛋白的复合物水溶液的生产工艺,其特征在于：动植物蛋白酶包括：菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、猪或其它的动物的胃蛋白酶、动物胰蛋白酶。