[发明专利]一种烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法，属于痕量分析技术领域。

背景技术

烟草作为吸食品，其农药残留量问题已成为吸烟安全性问题中的重要组成部分，烟草及烟草制品农药残留量指标是各国在烟草制品质量控制中的重要内容，已成为国际市场烟叶评价和选购的重要因素，也是烟草国际贸易中进行商品检验的重要内容。农药马来酰肼是烟草农残检测的重要指标，国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）农用化学品委员会（ACAC）在2008年提出了烟草及烟草制品中马来酰肼在内的136种农药的推荐性农残限量。

GB/T19611-2004【中华人民共和国国家标准GB/T19611-2004烟草及烟草制品抑芽丹残留量的测定紫外分光光度法】规定了烟草及烟草制品中马来酰肼的测定方法，为该农药残留量的检测提供了分析依据，但该法采用水蒸汽蒸馏法提取烟草中的农药残留，以分光光度法测定，操作步骤比较繁杂，对实验人员的操作水平要求较高。裴明黎等人在分析测试学报2009年05期发表了一篇文章：“马铃薯中马来酰肼的高效液相色谱法测定”，其对马铃薯样品经酸化甲醇提取，高速离心沉淀分离，以甲醇-去离子水（体积比1：9，pH2.7）为流动相，采用ZORBAXSBC18柱（250mm×4.6mm×5μm）分离，在UV205nm检测以外标法定量分析，最终测定结果表明，马来酰肼提取液的线性范围0.2-16.0mg/L，回收率82-94%。A.I.DIAS等人在PotatoResearch期刊1999年3月发表了2篇文章：“Therecoveryofmaleichydrazidefromprocessedpotatoproducts”及“Residuesoffreeandboundmaleichydrazideinpotatotubers”，均采用了高效液相色谱法分析了马铃薯中的马来酰肼。由于马铃薯样品和烟草样品基质不同，而且烟草样品的提取物更为复杂，净化方式也有很大的不同，因此此两篇文献报导的测定方法很难在烟草及烟草制品中应用，需要开发新的烟草及烟草制品中马来酰肼的检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种测定烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的方法，提高测定的准确性和抗干扰性。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法，包括如下步骤：

a、样品前处理：准确称取烟草或烟草制，加入盐酸溶液加热回流萃取；萃取后过滤并将滤液加入C18固相萃取小柱净化，然后采用氢氧化钠溶液洗脱，洗脱液再经滤膜过滤，制得样品溶液；

b、标准工作溶液配制：准确称取马来酰肼标准品于容量瓶中，定容并稀释于0.1-80.0μg/ml范围内配制至少三个浓度梯度的系列浓度标准工作溶液；

c、高效液相色谱测定：以0.1M的醋酸水溶液为流动相分别对步骤b中的各浓度梯度的系列浓度标准工作溶液进行高效液相色谱测定，以检测到的马来酰肼色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线及其回归方程；然后以相同方法对步骤a中的样品溶液进行测定，将样品色谱峰面积带入标准曲线的回归方程中得到样品溶液中的马来酰肼的浓度，从而计算得到烟草或烟草制品中马来酰肼的残留量。

所述步骤a中萃取的温度为180℃，萃取时间为1小时。

所述步骤a中洗脱液过滤采用的是0.45μm滤膜。

所述高效液相色谱条件为：VarianMicrosorb-MV100-5C18色谱柱，流速0.7mL/min，紫外检测波长313nm，柱温30℃。

所述流动相采用醋酸铵调节pH为4.8。

所述高效液相色谱的检测器为VWD检测器。

步骤a所述盐酸溶液的浓度为1-4mol/L。

步骤a所述氢氧化钠溶液的浓度为0.1mol/L。

本发明的烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法，采用液相萃取和固相萃取相结合的样品前处理方法，既缩短了样品的前处理时间，又提高了测定的准确性，使本发明的测定方法具有灵敏度高、重复性好及检测范围广的优点，平均回收率为99%，检测的范围为0.1-80μg/ml；而且本法的方法操作简单、快捷，自动化程度高，易于推广应用。

另外，本发明的烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法，针对马来酰肼及烟草或烟草制品的特点，对前处理及高效液相色谱的条件进行了优化，降低了杂质对马来酰肼测定的影响，进一步的提高了测定的准确性。

附图说明

图1为标准溶液的标准曲线图；

图2为标准溶液的色谱图；

图3为实施例1中样品溶液的色谱图；