[发明专利]一种葵花籽多肽的制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及葵花籽的深加工，具体是一种葵花籽多肽的制备方法和用途。

背景技术

现代研究表明，很多用蛋白酶水解的植物多肽具有抗氧化、清除自由基或阻断亚硝化合成等功能，可以作为食品或保健品的原料。例如专利CN101284872(200810064296.8)公开的玉米蛋白制备抗氧化活性肽；专利CN101228918(200710017281.1)公开的核桃多肽抗氧化粉。有些小分子多肽透皮吸收效果好，涂抹到皮肤上，不但能抵抗化妆品自身的氧化，而且能够清除人体自由基，抑制人体胶原蛋白和弹性蛋白的降解，降低皮肤衰老进程，从而起到抗皱、保持肌肤弹性的效果。例如日本的美能多化妆品株式会社的研究人员从大米的米胶蛋白中提取出一种新型多肽类物质，能有效抑制皮肤皱纹、松弛等现象，可以作为功能性化妆品基料。植物多肽的抗氧化活性和安全性使其成为今后功能性食品和化妆品开发的方向之一。

向日葵是我国重要的油料作物之一，每年的葵花籽产量约为420多万吨。葵花籽蛋白营养价值高，其氨基酸组成，除赖氨酸的含量较低外，其余必需氨基酸均达到或高于联合国粮农组织推荐的标准。葵花籽中蛋白含量为29％～43％，其中包括清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白等。长期以来，葵花籽榨油后的饼粕绝大多数用作肥料或者饲料，没有得到进一步的加工利用。国内外关于葵花籽蛋白制取活性多肽的研究报道较少，而且大多采用单酶水解方式，其水解度较低，小分子多肽的得率也较低，如任健等人采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶或者1.398中性蛋白酶对葵花蛋白进行单酶水解研究，水解度仅达到8～12.5％(任健，郑喜群.中性蛋白酶对葵花分离蛋白水解作用的研究.中国油脂，2007，8；刘欢，任健.碱性蛋白酶对脱脂葵花粕酶解条件的研究.粮油加工，2008，1；杜国军，任健.风味蛋白酶对脱脂葵花粕酶解条件的研究.粮油加工，2010，2)，还有采用木瓜蛋白酶(白羽.酶法制备葵花籽肽的研究.食品与机械，2007，10)或1.398枯草杆菌中性蛋白酶(陈洁.葵花浓缩蛋白的酶法改性研究.农业机械学报，2008，5)对葵花籽蛋白进行水解，水解度仅为4～15.6％。另外张国华采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶两步水解制备葵粕多肽(葵粕多肽抗皮肤光老化作用的研究.天然产物研究与开发，2010，22)，其水解时间过长，能耗较大，不适用于工业化生产。

目前超声波辅助技术已运用在生物酶解解蛋白过程中，如专利CN101457247(200810207956.3)公开的用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和V8蛋白酶等蛋白酶中的一种或多种酶进行快速水解蛋白质的方法；专利CN101003826(200610097286.5)公开的采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶或木瓜蛋白酶及这些酶的组合水解紫菜蛋白前，先用超声波预处理蛋白酶液后再混入紫菜溶液中进行酶解，明显缩短水解时间，但是，这种连续使用单一频率的超声波辅助酶解的方法，往往会造成酶活力下降、蛋白质作用位点被破坏等问题。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种时间短，能耗较低，酶解效率高，小分子多肽得率大的葵花籽多肽的制备方法以及葵花籽多肽在功能食品和化妆品中的用途。

本发明提供的一种葵花籽多肽的制备方法，包括如下步骤：

1)、提取蛋白：葵花籽经粉碎、脱脂后，用碱溶酸沉法提取葵花籽分离蛋白，真空干燥后备用；

2)、碱性蛋白酶水解：称取葵籽分离蛋白，按4％～8％的质量百分浓度溶于水，加入碱性蛋白酶，加酶量为分离蛋白的1.5％～2.5％，混合均匀，用NaOH调节pH至8.0～9.5，在超声波发生器中恒温50～60℃，先于20～28KHz超声频率水解2-3h，再于28～40KHz的超声频率下水解1-3h，在两阶段超声水解过程中，每隔5-12min超声处理1-4min；

3)、复合酸性蛋白酶水解：上述处理液用HCl调节pH 2.5～4.5，加入复合酸性蛋白酶，加酶量为分离蛋白的4％～6％，控制温度在35～45℃，在24～40KHz超声频率下水解4～6h，期间每隔6-12min超声处理1-3min，沸水浴5～10分钟灭酶，经微滤、超滤膜分离纯化，得到分子量在3000Da以下多肽占90％以上的产品。

所述的复合酸性蛋白酶是米曲霉酸性蛋白酶、宇佐美曲霉酸性蛋白酶、青霉产酸性蛋白酶、黑曲霉酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的任意两种或三种。