[发明专利]南芥菜花叶病毒的检测方法及专用试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测样品中是否含有目标物质的酶联免疫试剂盒，包括用于包被的抗体A，用于检测的抗体B，作为阳性对照的抗体C和用于显色的酶标抗体；所述抗体A为动物Ⅰ来源的抗目标物质的抗体，所述抗体B为动物Ⅱ来源的抗目标物质的抗体，所述抗体C为抗所述抗体A的抗体；动物Ⅰ和动物Ⅱ为不同物种的动物。

2.根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述酶标抗体为酶标抗体D和酶标抗体E，所述抗体D为抗所述抗体B的抗体，所述抗体E为抗所述抗体D的抗体；所述抗体D为抗所述抗体C的抗体。

3.根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述酶标抗体为酶标抗体D和酶标抗体E，所述抗体D为抗所述抗体B的抗体，所述抗体E为抗所述抗体D的抗体，所述抗体D为抗所述抗体E的抗体；所述抗体E为抗所述抗体C的抗体。

4.根据权利要求3所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述抗体A为小鼠来源的抗目标物质的抗体，所述抗体B为兔来源的抗目标物质的抗体，所述抗体C为山羊抗小鼠多克隆抗体，所述抗体D为山羊抗兔抗体，所述抗体E为兔抗山羊抗体。

5.根据权利要求1-4中任一所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述目标物质为植物病毒、植物细菌或植物真菌。

6.根据权利要求1-5中任一所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述植物病毒为南芥菜花叶病毒；所述抗体A为分泌抗南芥菜花叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株4G10 CGMCC No.3672分泌的单克隆抗体，所述抗体B为兔来源的抗南芥菜花叶病毒的多克隆抗体。

7.根据权利要求1-6中任一所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包括包被缓冲液、样品抽提缓冲液、酶标抗体稀释缓冲液、洗涤缓冲液、底物溶液；

每1升所述包被缓冲液按照如下方法配制：将碳酸钠1.59g，碳酸氢钠2.93g和叠氮化钠0.20g溶于水，用水定容至1L；包被缓冲液的ρH值为9.6；

每1升所述样品抽提缓冲液按照如下方法配制：将亚硫酸钠1.3g和聚乙烯基吡咯烷酮20g溶于PBST缓冲液中，用PBST缓冲液定容至1L；

每1升所述洗涤缓冲液按照如下方法配制：将氯化钠8.0g，磷酸二氢钾0.2g，磷酸氢二钠1.15g，氯化钾0.2g，吐温20 0.5mL，叠氮化钠0.2g溶于水中，用水定容至1L；所述洗涤缓冲液的ρH值为7.4；

每1升所述酶标抗体稀释缓冲液按照如下方法配制：将聚乙烯基吡咯烷酮20g和牛血清白蛋白2g溶于洗涤缓冲液中，用洗涤缓冲液定容至1L；

每1升所述底物溶液按照如下方法配制：将二乙醇胺97mL和硝基苯磷酸二钠1g溶于水中，调节ρH值至9.8，然后用水定容至1L；

所述酶标抗体中的酶是碱性磷酸酯酶。

8.一种检测样品中是否含有目标植物病毒的方法，包括如下步骤：用权利要求1-7中任一所述酶联免疫试剂盒对待测样品进行检测。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述方法中，在进行所述检测前，包括如下样品前处理的步骤：所述待测样品为植物组织，将所述植物组织与所述样品抽提缓冲液混合，得到混合物Ⅰ；将所述混合物磨碎，得到混合物Ⅱ，即为待检测液体；

和/或，所述植物组织为植物叶片。

10.保藏编号为CGMCC No.3672的分泌抗南芥菜花叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株4G10；或由分泌抗南芥菜花叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株4G10 CGMCC No.3672分泌得到的单克隆抗体。