[发明专利]一种量子点免疫荧光探针的制备方法无效
申请号: | 201010220275.8 | 申请日: | 2010-07-08 |
公开(公告)号: | CN101907625A | 公开(公告)日: | 2010-12-08 |
发明(设计)人: | 牛婉婷;张路遥;潘敏;陈裕泉 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | G01N33/536 | 分类号: | G01N33/536 |
代理公司: | 杭州之江专利事务所 33216 | 代理人: | 连寿金 |
地址: | 310027 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 量子 免疫 荧光 探针 制备 方法 | ||
1.一种量子点免疫荧光探针的制备方法,其特征在于采用如下步骤:
A)用浓度为0.2mol/L,pH值为7.2-7.6的磷酸盐缓冲液溶解1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和N-羰基琥珀酸亚胺,配制成羧基活化剂,活化剂中1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺和N-羰基琥珀酸亚胺的浓度均为50mg/mL,将该活化剂按体积比1∶8加入至浓度为1mg/mL市售羧基化量子点中,在室温下轻微振荡使羧基活化形成活泼酯,经高速离心机分离使量子点沉降,弃去上清液;
B)往步骤A)的量子点沉淀中加入A)中使用的磷酸盐缓冲液,在涡旋振荡器上轻微振荡使量子点重新悬浮至A)加入活化剂后的体积,再高速离心机分离及重悬,照此重复2次,再次高速离心使量子点沉降;
C)加入浓度为1mg/mL的抗体溶液,轻微振荡使量子点在抗体溶液中重新悬浮至步骤A)中加入活化剂后的体积,并使抗体与羧基活化的量子点充分接触,发生共价偶联反应,在室温下放置1h,每隔20min轻微振荡一次,1h后经低速离心机分离使形成的量子点团块沉降,所得上清液即为量子点免疫荧光探针。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:抗体是针对不同蛋白,或者蛋白的一个结构域,或者一段多肽的单克隆抗体,或者是针对来自不同物种蛋白的多克隆抗体。
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