[发明专利]一种保藏微藻藻种的方法有效
申请号: | 201010222005.0 | 申请日: | 2010-07-07 |
公开(公告)号: | CN102311919A | 公开(公告)日: | 2012-01-11 |
发明(设计)人: | 师文静;王领民;金平;李晓姝;王崇辉 | 申请(专利权)人: | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司抚顺石油化工研究院 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12R1/89 |
代理公司: | 抚顺宏达专利代理有限责任公司 21102 | 代理人: | 李微 |
地址: | 100728 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 保藏 微藻藻种 方法 | ||
1.一种保藏微藻藻种的方法,包括以下内容:将所要保藏藻种收集,获得藻泥,然后将藻泥与保护剂混合制成藻种细胞悬液,上述藻种细胞悬液经过程序预冻过程,最终完全冻结;其特征在于:冻结后的藻种细胞悬液在减压的条件下使水分升华,形成固形海绵体状物质保藏即可;保护剂为脱脂乳和维生素的复合保护剂,以重量计脱脂乳的含量为5%~20%,维生素0.5%~2%。
2.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:所保藏的微藻藻种选自小球藻、葡萄藻、小环藻、微绿球藻、硅藻的任何一种。
3.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:藻种细胞悬液的细胞密度为1.0×108~5.0×109个/mL。
4.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:程序预冻过程采用逐步降温的方式对藻种细胞悬液进行预冻。
5.按照权利要求1或4所述的方法,其特征在于:程序预冻过程进行三级预冻过程,室温~4℃维持4~6小时,4℃以下至-18℃维持4~6小时,-18℃以下至-60℃维持4~6小时。
6.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:藻种收集方法为将处于稳定生长期的藻液通过镜检,确定无杂菌后低温下离心收集藻泥。
7.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:用安瓿管分装藻种细胞悬液,在冷冻设备中采取分级降温进行预冻。
8.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:冻结后的藻种细胞悬液在减压的条件下使水分升华的过程采用冷冻真空干燥操作,冷冻真空干燥在-50℃以下进行。
9.按照权利要求8所述的方法,其特征在于:冷冻真空干燥后的样品熔封在安瓿管中。
10.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:采用室温或低温保藏微藻藻种。
11.按照权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的维生素为维生素B、维生素C、维生素E中的一或几种。
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