[发明专利]荧光图像获取装置、荧光图像获取方法和荧光图像获取程序

权利要求书

1.一种荧光图像获取装置，包括：

激励光源，用于将激励光照射至生物样本上的荧光标记；

暗视野照明系统；

物镜，用于放大所述生物样本的部位的图像；

摄像装置，用于形成由所述物镜放大的所述部位的图像，

以作为所述部位的荧光图像；

焦点移动控制装置，用于在所述生物样本的厚度方向上移动所述物镜的焦点；以及

摄像控制装置，用于在所述生物样本的厚度方向上移动所述物镜的焦点的同时，将所述摄像装置曝光，并从所述摄像装置获取由所述物镜放大的所述部位的图像，以作为所述部位的所述荧光图像。

2.根据权利要求1所述的荧光图像获取装置，所述荧光图像获取装置还具有噪声消除装置，所述噪声消除装置使用由于对所述图像拾取装置的曝光而在所述荧光图像上的特定点产生的噪声的图案化图像，从所述荧光图像上消除所述噪声。

3.根据权利要求1所述的荧光图像获取装置，所述荧光图像获取装置还具有计算装置，其用于：

对于所述荧光图像上的每个细胞核，对满足圆形条件的光点进行计数；

排除包含不满足所述圆形条件的光点的各个细胞核，以产生剩余的细胞核；以及

对于每个所述剩余的细胞核，计算与光点相关的值。

4.根据权利要求1所述的荧光图像获取装置，所述荧光图像获取装置还具有计算装置，其用于：

对于所述荧光图像上的每个细胞核，计算均满足圆形条件以用作基于所述荧光标记的光点的第一光点的数量，所述荧光标记用于标记所述生物样本的目标分子；

对于所述荧光图像上的每个细胞核，计算均满足所述圆形条件以用作基于所述荧光标记的光点的第二光点的数量，所述荧光标记用于标记所述生物样本的照射对象分子；

排除包含均不满足所述圆形条件的所述第一光点和所述第二光点的细胞核，并且排除具有与设定数量不同的第二光点数的细胞核，以产生剩余的细胞核；以及

计算任一个特定的剩余的细胞核的所述第一光点的数量除以该特定的剩余的细胞核的所述第二光点的数量所得的商的平均值，每个所述第一光点均基于用于标记所述目标分子的所述荧光标记，每个所述第二光点均基于用于标记所述照射对象分子的所述荧光标记。

5.根据权利要求3所述的荧光图像获取装置，所述荧光图像获取装置还具有：

图像产生装置，用于使用由所述物镜放大的荧光图像来作为所述生物样本的所述部位的荧光图像，以产生所述生物样本的荧光图像；以及

信息记录装置，用于记录对于所述生物样本的所述荧光图像所产生的信息作为表示在所述计算装置执行的计算处理过程中被排除的各个所述细胞核的位置的信息，所记录的所述信息与所述生物样本的所述荧光图像相关联。

6.一种荧光图像获取方法，包括以下步骤：

对其上附有荧光标记的生物样本执行暗视野照明；

焦点移动步骤，在其上附有所述荧光标记的所述生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点；

在所述焦点移动步骤中移动所述物镜的焦点的同时，将摄像装置曝光，所述摄像装置上产生有由所述物镜放大以作为所述生物样本的部位的荧光图像的图像；以及

以所述焦点移动步骤中所述物镜的焦点进行的所述移动的终点为契机，从所述摄像装置获取由所述物镜放大以作为所述生物样本的所述部位的荧光图像的所述图像。

7.一种荧光图像获取程序，其由计算机来执行，以进行以下处理，包括：

光照射处理，对其上附有荧光标记的生物样本执行暗视野照明；

焦点移动处理，在其上附有所述荧光标记的所述生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点；

曝光处理，在所述生物样本的厚度方向上移动所述物镜的焦点的同时，将摄像装置曝光，所述摄像装置上产生有由所述物镜放大以作为所述生物样本的部位的荧光图像的图像；以及

图像获取处理，以所述物镜的焦点进行的在所述生物样本的厚度方向上的所述移动的终点为契机，从所述摄像装置获取由所述物镜放大以作为所述生物样本的所述部位的荧光图像的所述图像。