[发明专利]荧光图像获取装置、荧光图像获取方法和荧光图像获取程序

说明书

相关申请的参考 

本申请包含涉及于2009年7月10日向日本专利局提交的日本优先权专利申请JP 2009-163775中所公开的主题，其全部内容结合于此作为参考。 

技术领域

总体上，本发明涉及荧光图像获取装置、荧光图像获取装置所采用的荧光图像获取方法和实现荧光图像获取方法的荧光图像获取程序。例如，本发明可很好地应用于观察荧光染色组织切片的领域。 

背景技术

牢固地支持在载玻板上的组织切片是典型的生物样本。如果需要的话，在保存到某处之前将组织切片染色。通常，当组织切片保存时间变长时，组织切片变质和/或组织切片褪色。通常，用显微镜观察用作生物样本的组织切片。然而，如果组织切片已经变质和/或组织切片已经褪色，则作为组织切片的可见度的由显微镜提供的可见度变差。另外，在一些情况下，在制作样本的医院外面的实验室诊断这种生物样本。在这种情况下，通常用邮件将生物样本从医院发送至实验室。也就是说，需要花费时间将生物样本从医院发送至实验室。 

为了解决上述问题，已经提出一种用于将生物样本保存为图像数据的设备。对于这种设备的进一步信息，建议读者参考诸如日本专利公开第2003-222801号的文献。 

发明内容

顺便提及，在获得荧光染色组织切片的荧光图像的操作中，在荧光染色组织切片的厚度方向上将焦点以预先确定的间隔从一个位置移动到另一个位置。然后，在每个焦点获得的荧光图像用于产生图像数据。这样，可获取荧光图像并且不会失去(drop)荧光标记，该荧光标记将分子标示为获取图像的操作对象。然而，在此情况下，一个生物样本的荧光图像的数量显著增加。结果，每个生物样本的处理工作量和每个生物样本的图像数据量也不可避免地增加。 

如果移动焦点的位置之间的间隔在生物样本的厚度方向上增加，那么，另一方面，能够减小一个生物样本的荧光图像的数量。结果，每个生物样本的处理工作量和每个生物样本的图像数据量也能够减少。然而，随着移动焦点的位置之间的间隔在生物样本的厚度方向上增加，如果在获取荧光图像的操作中使用具有小焦点深度的物镜，那么，失去将分子标示为获取图像的操作对象的荧光标记是完全有可能的。结果，测量荧光标记的操作的精度变差。 

为了解决上述问题，本发明的发明人已创新出一种在减小处理工作量和图像数据量的同时能够将测量荧光标记的操作的精度维持在一定水平的荧光图像获取装置，创新出一种荧光图像获取装置所采用的荧光图像获取方法，以及创新出一种实现荧光图像获取方法的荧光图像获取程序。 

为了解决上述问题，本发明的实施方式提供了一种荧光图像获取装置，其采用： 

激励光源，用于将激励光照射至生物样本上的荧光标记； 

暗视野照明系统； 

物镜，用于放大生物样本的部位的图像； 

摄像装置，用于形成由物镜放大的部位的图像，以作为该部位的荧光图像； 

焦点移动控制部，被配置为在生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点；以及 

摄像控制部，被配置为在生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点的同时，将摄像装置曝光，并从摄像装置获取由物镜放大的部位的图像，以作为部位的荧光图像。 

另外，本发明的实施方式还提供一种荧光图像获取方法，其包括： 

光照射步骤，对其上附有荧光标记的生物样本执行暗视野照明； 

焦点移动步骤，在其上附有荧光标记的生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点； 

曝光步骤，在焦点移动步骤中在生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点的同时，将摄像装置曝光，该摄像装置上产生有由物镜放大以作为生物样本的部位的荧光图像的图像；以及 

图像获取步骤，以在焦点移动步骤中物镜的焦点进行的移动的终点为契机(触发点，trigger)，从摄像装置获取由物镜放大以作为生物样本的部位的荧光图像的图像。 

另外，本发明的实施方式还提供一种由计算机执行的以执行处理的荧光图像获取程序，其包括： 

光照射处理，对其上附有荧光标记的生物样本执行暗视野照明； 

焦点移动处理，在其上附有荧光标记的生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点； 

曝光处理，在焦点移动处理中在生物样本的厚度方向上移动物镜的焦点的同时，将摄像装置曝光，该摄像装置上产生有由物镜放大以作为生物样本的部位的荧光图像的图像；以及 

图像获取处理，以物镜的焦点进行的在生物样本的厚度方向上的移动的终点为契机，从摄像装置获取由物镜放大以作为生物样本的部位的荧光图像的图像。