[发明专利]二十二碳六烯酸的制备方法

权利要求书

1.裂殖壶菌全合成培养基，其特征在于其组成是：

碳源：葡萄糖100～130g/L；

氨基酸：丙氨酸1.8～2.2g/L、甲硫氨酸1.0～1.5g/L、半胱氨酸0.15～0.3g/L、赖氨酸0.2～0.5g/L、组氨酸1.2～1.4g/L、谷氨酸1.3～1.6g/L、谷氨酰胺1.3～1.6g/L、异亮氨酸1.2～1.5g/L、苏氨酸0.9～1.2g/L、色氨酸1.5～1.8g/L；

维生素：VB₁ 2～8mg/L，VB₁₂ 8～14mg/L，生物素3～9mg/L，硫辛酸15～30mg/L，叶酸38～42mg/L；

无机盐(人工海水)：NaCl 14～18g/L，KCl 0.3～0.5g/L，MgCl₂ 2.3～2.5g/L，CaCl₂ 0.6～0.75g/L，Na₂HPO₄ 0.35g/L，KH₂PO₄ 1.2g/L；

微量元素：AlCl₃ 1～1.3mg/L，H₃BO₃ 20～25mg/L，ZnSO₄.7H₂O 2.6～3.0mg/L，MnCl₂.4H₂O 1.5～2mg/L，CuSO₄.5H₂O 2～3mg/L，FeSO₄.7H₂O 20～25mg/L，(NH₄)₆Mo₇O₂₄.4H₂O 0.1～0.12mg/L；

余为水。

2.如权利要求1所述的裂殖壶菌全合成培养基的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)在全部无机盐溶液中加入碳源葡萄糖及氮源氨基酸后，用NaOH或柠檬酸调节pH至6.0～6.5，并灭菌，得到未添加维生素和微量元素的培养基；

2)将所有的维生素和微量元素配成溶液后用膜过滤除菌，然后再加到步骤1)所得的培养基中，即制成裂殖壶菌全合成培养基。

3.如权利要求2所述的裂殖壶菌全合成培养基的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述灭菌，是在115℃高压灭菌20min。

4.如权利要求2所述的裂殖壶菌全合成培养基的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述膜的孔≤0.2μm。

5.采用如权利要求1所述裂殖壶菌全合成培养基培养裂殖壶菌的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)菌种：裂殖壶菌；

2)菌种活化：将保藏于-80℃的菌种转接于斜面，25℃、200r/min培养1～2天；一级种子：用接种环挑取活化的菌种，接入装有50mL种子培养基的250mL三角瓶，25℃、200r/min培养1天；二级种子：取4mL的一级种子，接入装有100mL种子培养基的500mL三角瓶，25℃、200r/min培养1天；种子培养基为：30g/L葡萄糖，10g/L酵母膏，0.5倍浓度自然海水；

3)扩大培养：将二级种子以4％的接种量接种于全合成培养基，培养条件同上。

6.采用如权利要求1所述裂殖壶菌全合成培养基制备二十二碳六烯酸的方法，其特征在于其步骤为：

采用所述裂殖壶菌全合成培养基于摇瓶培养裂殖壶菌，于25℃、200r/min培养4天，即得二十二碳六烯酸。