[发明专利]一种肠球菌属多重PCR检测引物及方法无效
申请号: | 201010240001.5 | 申请日: | 2010-07-29 |
公开(公告)号: | CN101880728A | 公开(公告)日: | 2010-11-10 |
发明(设计)人: | 王亚宾;胡慧;孟振北;段志刚;陈丽颖;胡清林;耿鑫 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/10;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州中原专利事务所有限公司 41109 | 代理人: | 张绍琳 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 球菌 多重 pcr 检测 引物 方法 | ||
1.一种肠球菌属多重PCR检测引物,其特征在于:它的序列如下:
肠球菌属引物的序列如下:
上游引物E1:5′-GTGTCGCTGATGGATGG-3′;
下游引物E2:5′-GCAAGCCGAACTGAGAGA-3′;
粪肠球菌种引物的序列如下:
上游引物FL1:5′-ACATATGTGAATAACTTAACC-3′;
下游引物FL2:5′-TATTGGTGACTCTTGGTTTGG-3′;
屎肠球菌种引物的序列如下:
上游引物FM1:5′-GATAATACAATAGAAGAATTAT-3′;
下游引物FM2:5′-AGCTTTTTTGATATTCTTCTTTA-3′。
2.利用权利要求书1所述的肠球菌属多重PCR检测引物检测肠球菌属的方法,包括提取样品的DNA后,用PCR反应体系和PCR反应程序对样品进行检测,其特征在于:
所述PCR反应体系,在25μl体系中加入以下成份:
2×PCR TaqMix 8μl
E1/FL1/FM1 3μl
E1/FL2/FM2 3μl
模板DNA 2μl
dd H2O 9μl
总体积 25μl
所述PCR反应程序为:
95℃预变性5min;进入循环,94℃变性30s,49℃退火1min,72℃延伸1min 10s,30个循环;72℃终止10min。
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