[发明专利]一种提取并纯化洛伐他汀的方法

说明书

技术领域

本发明涉及原料药的制备方法，特别涉及从发酵液中提取精制洛伐他汀的方法，属于医药领域。

背景技术

洛伐他汀(Lovastatin)是微生物来源的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂类降胆固醇药物，因其作用机理明确，临床疗效显著，是目前临床上重要的防治心脑血管疾病药物。洛伐他汀是真菌的次生代谢产物，工业上主要的产生菌有土曲霉(Aspergillus terreus)、桔青霉(Penicillium citrinum)和红曲霉(Monascus ruber)，现有提取制备洛伐他汀的方法主要是将发酵液加热、碱化过滤，然后对滤液进行萃取或对滤液进行树脂交换提取。

美国专利US 2003215932(A1)阐述的洛伐他汀提取方法是将发酵液用硫酸酸化并加热，在高温下搅拌环化，然后对发酵液用甲苯萃取，滤渣用碳酸氢钠液和无盐水洗涤，然后进行真空浓缩，低温结晶分离，洗涤。此发明中甲苯用量大，由于其巨毒性，给环保带来很大压力，生产线上的员工的健康受到很大威胁，不利于大生产。

PCT专利申请WO 9720834阐述了一种洛伐他汀提取方法，将发酵液用NaOH调到碱性，然后用甲苯和乙醇混合溶媒在搅拌下萃取，在萃取液中加入大量的甲苯和珍珠岩，用硝酸酸化，搅拌下加氯仿，压滤，浓缩，结晶得粗品再重结晶。此法使用混合溶媒，回收困难，萃取中乳化严重，环保压力大，同时由于使用多种溶媒使生产操作变得复杂。

为了弥补上述技术的不足，在PCT专利申请WO 0063411提供了一种新方法：用NaOH调发酵液至碱性，在低温下搅拌，离心分离，收集上清用硫酸调至酸性，加入丁酯和正辛烷的混合溶媒萃取，离心分离，萃取液真空浓缩低温结晶。此发明中仍然使用混合溶媒萃取，回收困难，碱性萃取乳化严重，需使用大量的破乳剂，给后面的精制过程带来了困难。

更进一步的，美国专利NO.5712130中采用的方法是：用盐酸调发酵液至酸性，冷却后加丁酯萃取，真空浓缩萃取液，在低温结晶。但是，该方法仍然存在一些缺点：萃取溶媒用量大，易乳化，萃取过程的纯化不够，只靠后面的重结晶来提纯，产品的溶解性差。

中国专利申请公开说明书CN 1583736A提供了一种用树脂提取发酵液中洛伐他汀的方法：将发酵液碱化，过滤，用树脂进行吸附，用乙醇、丙酮等有机溶剂的水混合液进行洗脱，洗脱液浓缩结晶得粗品，然后进行重结晶。该方法也存在较大不足：设备多，占用面积大，浓缩的料液体积巨大，能耗大；洗脱用有机溶剂回收困难；产品的纯度主要通过重结晶来控制，产品质量在生产中得不到有效保证。

综上，现有的洛伐他汀提取方法主要存在以下缺点：

1、萃取液或洗脱液体积大，提取过程中乳化严重，生产操作复杂；

2、质量控制主要集中在最后的重结晶处理上，质量难以得到有效保证；

3、产品的溶解性差，在进行半合成时，易乳化，严重影响收率。

发明内容

本发明的目的是提供一种从富含洛伐他汀的发酵液提取并纯化洛伐他汀的方法，在解决洛伐他汀萃取中的乳化难题、提高收率的同时，加强中间过程的物料纯化，提高成品质量，解决洛伐他汀产品普遍存在的溶解性差的问题，提高洛伐他汀产品在丙酮、氯仿、甲醇中的溶解性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种提取并纯化洛伐他汀的方法，包括以下步骤：

1)将生产洛伐他汀的发酵液酸化至pH1～3，然后过滤或离心分离，收集菌渣；

2)用有机溶剂萃取菌渣，萃取液依次用碱性水溶液、酸性水溶液和去离子水洗涤；

3)洗涤后的萃取液浓缩、结晶，分离并干燥晶体得到粗品；

4)对粗品重结晶，获得纯化的洛伐他汀。

在步骤1)发酵液的酸化过程中，通常是用HCl将发酵液酸化到pH1～3，搅拌沉化1-2小时，细胞内的洛伐他汀保留在孢内，使孢外的洛伐他汀酸充分沉淀，保证过滤后的滤液中或离心后的废水中洛伐他汀单位在100u/ml以内。

酸化后通过过滤或者离心分离来收集菌渣，过滤可以用传统的板框式过滤，离心可用分离机分离，将菌渣自动输送到萃取工序，减少劳动强度，提高收率。

步骤2)的萃取处理中，根据发酵液中洛伐他汀单位含量计算有机溶剂用量，按萃取液中洛伐他汀含量为3-4万单位/ml加入非水溶性有机溶剂，例如甲苯、丁酯、乙酯和氯仿中的一种，在温度50-60℃条件下搅拌萃取3-6小时，用分离机分离或密闭条件下进行真空抽滤，收集有机萃取液，对萃取液进行洗涤。