[发明专利]猪流感病毒和猪蓝耳病病毒混合病毒样颗粒、制备方法和应用有效
| 申请号： | 201010248662.2 | 申请日： | 2010-08-09 |
| 公开（公告）号： | CN102373181A | 公开（公告）日： | 2012-03-14 |
| 发明（设计）人： | 曹永长;刘大才;薛春宜 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;C12N15/866;A61K39/295;A61P31/16;A61P31/14;A61K39/145;A61K39/12 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 流感病毒 猪蓝耳病 病毒 混合 颗粒 制备 方法 应用 | ||
1.混合病毒样颗粒，其特征在于，包含：
猪流感病毒的基质蛋白M1；
猪流感病毒的表面抗原红细胞凝集素HA；
一个融合膜蛋白，其包含猪蓝耳病病毒GP5蛋白的主要抗原表位的膜外域，流感病毒的红细胞凝集素HA的跨膜区和膜内区；所述含猪蓝耳病病毒GP5蛋白的主要抗原表位的膜外域替换流感病毒的红细胞凝集素HA的5’端的大致相同长度的膜外域；
在所述混合病毒样颗粒的表面上同时表达流感病毒的表面抗原红细胞凝集素HA和猪蓝耳病病毒GP5蛋白。
2.如权利要求1所述的混合病毒样颗粒，其中所述混合病毒样颗粒还含有猪流感病毒的神经氨酸苷酶NA。
3.如权利要求1或2所述的混合病毒样颗粒，其中所述混合病毒样颗粒还含有猪流感病毒的核蛋白NP。
4.如权利要求1所述的混合病毒样颗粒，其中融合膜蛋白的序列如SEQ ID NO：10所示。
5.猪流感和蓝耳病二价疫苗，其特征在于，包含如权利要求1-4所述的混合病毒样颗粒和佐剂。
6.制备混合病毒样颗粒的方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：
构建昆虫杆状病毒表达载体，其表达载体含有猪流感病毒的基质蛋白M1，猪流感病毒的表面抗原红细胞凝集素HA，或一个融合膜蛋白，其包含猪蓝耳病病毒GP5蛋白的主要抗原表位的膜外域，猪流感病毒的红细胞凝集素HA的跨膜区和膜内区；所述含猪蓝耳病病毒GP5蛋白的主要抗原表位的膜外域替换猪流感病毒的红细胞凝集素HA的5’端的大致相同长度的膜外域；
用所述构建的昆虫杆状病毒表达载体按比例同时感染昆虫细胞，包装出混合病毒样颗粒，其表面上同时表达猪流感病毒的表面抗原红细胞凝集素HA和猪蓝耳病病毒GP5蛋白。
7.如权利要求6制备混合病毒样颗粒的方法，其特征在于，其中所述构建昆虫杆状病毒表达载体还含有猪流感病毒的神经氨酸苷酶NA，其包装出混合病毒样颗粒含有猪流感病毒的神经氨酸苷酶NA。
8.如权利要求6或7制备混合病毒样颗粒的方法，其特征在于，其中所述构建昆虫杆状病毒表达载体还含有猪流感病毒的核蛋白NP，其包装出混合病毒样颗粒含有猪流感病毒的核蛋白NP。
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