[发明专利]一种在同一体系中检测IgM抗体和IgG抗体的方法

权利要求书

1.一种在同一体系中检测IgM抗体和IgG抗体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)将待测样品与第一抗原溶液混合，其中所述的第一抗原溶液含有1-50种不同的抗原，所述的每一种抗原偶联于不同的微球而形成式I所示的第一抗原-微球的二元复合物，

Ag-bead    (I)

式中，Ag表示抗原，bead表示微球，-表示抗原与微球之间的共价键；

从而使待测样品中的抗体与所述抗原形成“抗体-抗原-微球”三元复合物，其中所述的“抗体-抗原-微球”三元复合物包括“IgM抗体-抗原-微球”三元复合物”和“IgG抗体-抗原-微球”三元复合物；

(b)将步骤(a)形成的溶液与第二抗体溶液混合，其中所述的第二抗体溶液含有1-50种不同的带有可检测信号的第二抗体，所述的每一种第二抗体分别是针对该抗原的IgM抗体的抗体，从而形成“第二抗体-IgM抗体-抗原-微球”的IgM抗体四元复合物；

(c)检测IgM抗体四元复合物中不同微球的可检测信号，从而确定待检测样品中各IgM抗体的存在与否，

附加条件是待测样品与第一抗原溶液和第二抗体溶液的混合，可依次进行，也可同时进行；

(d)将步骤(c)检测后的形成的溶液与第三抗体溶液混合，其中所述的第三抗体溶液含有1-50种不同的带有可检测信号的第三抗体，所述的每一种第三抗体分别是针对该抗原的IgG抗体的抗体，从而形成“第三抗体-IgG抗体-抗原-微球”的IgG抗体四元复合物；

(e)检测IgG抗体四元复合物中不同微球的可检测信号，从而确定待检测样品中各IgG抗体的存在与否。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的第二抗体带有的可检测信号和第三抗体带有的可检测信号是相同的或不同的。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的可检测信号是荧光信号。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的微球是平均粒径为2-10μm、且染上不同荧光的聚苯烯微球。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的抗原包括：病毒抗原、肿瘤抗原、细菌抗原、寄生虫抗原等。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述的第二抗体溶液和第三抗体溶液中，各第二抗体和第三抗体的浓度为0.1-200ug/ml。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)和(e)中用Luminex xMAP法进行检测。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)和(e)中包括：将测定的可检测信号与质控或标准曲线进行比较，从而确定待检测样品中抗体的存在与否，和/或数量。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的第二抗体带有的可检测信号和第三抗体带有的可检测信号是相同的，并且在步骤(e)中包括步骤：将步骤(e)中测得的可检测信号的读数减去步骤(c)中测得的可检测信号的读数，作为判断IgG抗体存在与否，和/或数量的依据。

10.一种用于在同一体系中检测IgM抗体和IgG抗体的试剂盒，其特征在于，它包括以下组分：

(a’)第一容器以及装于该容器中的第一抗原溶液，其中所述的第一抗原溶液含有1-50种不同的抗原，所述的每一种抗原偶联于不同的微球而形成式I所示的第一抗原-微球的二元复合物，

Ag-bead    (I)

式中，Ag表示抗原，bead表示微球，-表示抗原与微球之间的共价键；

(b’)第二容器以及装于该容器中的第二抗体溶液，其中所述的第二抗体溶液含有1-50种不同的带有可检测信号的第二抗体，所述的每一种第二抗体分别是针对该抗原的IgM抗体的抗体，从而形成“第二抗体-IgM抗体-抗原-微球”的IgM抗体四元复合物；

(c’)第三容器以及装于该容器中的第三抗体溶液，其中所述的第三抗体溶液含有1-50种不同的带有可检测信号的第三抗体，所述的每一种第三抗体分别是针对该抗原的IgG抗体的抗体，从而形成“第三抗体-IgG抗体-抗原-微球”的IgG抗体四元复合物。