[发明专利]用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框、表达载体及制备方法有效
申请号: | 201010266735.0 | 申请日: | 2010-08-30 |
公开(公告)号: | CN102002495A | 公开(公告)日: | 2011-04-06 |
发明(设计)人: | 何太平;葛永红;谭晓晶;聂艳桃;杨波;糖箐燕;宋春雷;雷韬 | 申请(专利权)人: | 成都蓉生药业有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/10 |
代理公司: | 成都虹桥专利事务所 51124 | 代理人: | 武森涛 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 表达 二聚体 糖蛋白 激素 载体 制备 方法 | ||
1.用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框,其特征在于其结构为在启动子后可操作的连接有双亚基糖蛋白激素的α亚基和β亚基的编码序列,各个亚基的编码序列之间用内部核糖体进入位点序列IRES进行连接。
2.根据权利要求1所述的用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框,其特征在于:所述的α亚基的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示或为其简并序列。
3.根据权利要求2所述的用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框,其特征在于:所述的β亚基的核苷酸序列为SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4或SEQ ID No.5中的任一项所示或为其简并序列。
4.根据权利要求1所述的用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框,其特征在于:所述的启动子为巨细胞病毒启动子。
5.根据权利要求1所述的用于表达异二聚体糖蛋白激素的表达框,其特征在于:所述的内部核糖体进入位点序列为SEQ ID No.6所示。
6.一种用于表达异二聚体糖蛋白激素的的表达载体,其特征在于:所述载体上具有权利要求1~6任一项所述的表达框。
7.根据权利要求6所述表达载体,其特征在于:所述载体为pcDNA5。
8.根据权利要求7所述表达载体,其特征在于:该载体的核苷酸序列为SEQ ID No.7所示。
9.含有权利要求6或7或8所述的表达载体的宿主细胞。
10.制备权利要求1~5任一项所述的表达异二聚体糖蛋白激素的表达框的方法,其特征在于包括以下步骤:从基因库中获得人β亚基和α亚基的序列以及IRES基因序列,在基因水平上按β亚基-IRES-α亚基或α亚基-IRES-β亚基模式对人糖蛋白激素的β亚基和α亚基的序列以及IRES基因序列进行拼接,并在5端和3端设计与目标载体结合的内切酶位点,进行PCR方法并接得到或全基因合成得到。
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