[发明专利]小麦黄矮病毒的多重PCR检测方法无效
| 申请号： | 201010267645.3 | 申请日： | 2010-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN101921876A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 吴云锋;杨洋 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京亿腾知识产权代理事务所 11309 | 代理人： | 陈惠莲 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小麦 病毒 多重 pcr 检测 方法 | ||
1.一种利用多重PCR反应同时检测小麦黄矮病种群中PAV、GPV、GAV三种病毒的方法，该方法包括小麦病毒总RNA的提取、逆转录反应制备cDNA模板，多重PCR反应，电泳检测，确定病毒种类，其特征在于逆转录反应制备cDNA模板应用引物SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.6，多重PCR反应中应用引物SEQ ID NO.1-6，多重PCR反应的反应体系中，缓冲液浓度为0.4×-0.9×；dNTPs浓度为0.1-0.5mM；Mg2+浓度为1.0-3.5mM；退火温度为51-55℃；循环次数为20-45次；延伸时间为30-55s。
2.根据权利要求1所述的方法，其中多重PCR反应的反应体系中，缓冲液浓度为0.8×或0.9×，dNTPs浓度为0.4mM或0.5mM，Mg2+浓度为2.5mM或3.5mM，退火温度54℃，延伸时间45s，循环次数30次。
3.根据权利要求1所述的方法，多重PCR反应的反应体系中，Taq DNA聚合酶浓度为0.04U/μL-0.06U/μL。
4.根据权利要求1所述的方法，多重PCR反应的反应体系中，缓冲液浓度为0.9×，dNTPs浓度为0.4mM，Mg2+浓度为3.5mM，Taq DNA聚合酶浓度为0.06U/μL。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其中多重PCR反应的反应体系中，3对引物之间的摩尔比例为PAV∶GPV∶GAV＝2∶1∶1。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西北农林科技大学，未经西北农林科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201010267645.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
