[发明专利]蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用无效
申请号: | 201010268407.4 | 申请日: | 2010-08-31 |
公开(公告)号: | CN102007940A | 公开(公告)日: | 2011-04-13 |
发明(设计)人: | 蔡俊鹏;鲍星 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | A01N63/00 | 分类号: | A01N63/00;A01P1/00;A61K35/74;A61P31/04 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘晖 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 弧菌 混合 制备 防治 大菱鲆 病菌 中的 应用 | ||
1.蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,所述蛭弧菌混合体为蛭弧菌蛭质体和游泳体混合。
2.根据权利要求1所述的蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,其特征在于:所述蛭弧菌混合体制备方法为:
(1)接种宿主于营养肉汤液体培养基中,在35℃和200rpm摇床培养12h,培养液经4℃,5000~8000rpm离心10~20min后,沉淀加入至DNB液体培养基中,接入蛭弧菌BDM01,在温度25~35℃下,以150~300rpm摇床培养36~48h,得到含蛭弧菌蛭质体和蛭弧菌游泳体的培养液,培养液在4℃温度下以6000~8000rpm离心15~20min后,去除含蛭弧菌游泳体的上清,得到的沉淀即为蛭弧菌蛭质体;将蛭弧菌蛭质体用DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2~7.6的磷酸盐缓冲液悬浮,得到浓度为106~109pfu/mL的蛭弧菌蛭质体菌液;
(2)将步骤(1)得到的含蛭弧菌游泳体的上清经16000~18000rpm离心15~20min后,沉淀用DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2~7.6的磷酸盐缓冲液悬浮,得到浓度为106~109pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液;
(3)将步骤(1)得到的蛭弧菌蛭质体菌液和步骤(2)得到的游泳体菌液混合得蛭弧菌混合体。
3.根据权利要求1所述的蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,其特征在于:所述蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDM01,于2008年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 208066。
4.根据权利要求1所述的蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,其特征在于:所述蛭弧菌混合体中蛭弧菌蛭质体与蛭弧菌游泳体细菌数比为1∶1。
5.根据权利要求1所述的蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,其特征在于:所述蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用是向水体中泼洒防治大菱鲆红嘴病菌剂,使水体中蛭弧菌混合体终浓度为10-107pfu/mL。
6.根据权利要求1所述的蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用,其特征在于:所述蛭弧菌混合体在制备防治大菱鲆红嘴病菌剂中的应用是将饲料用防治大菱鲆红嘴病菌剂浸泡15~45min,菌剂中蛭弧菌混合体浓度为10-107pfu/mL。
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