[发明专利]一种亚洲雨林蝎毒抗菌多肽基因及制备方法和应用无效
申请号: | 201010270574.2 | 申请日: | 2010-09-02 |
公开(公告)号: | CN101948842A | 公开(公告)日: | 2011-01-19 |
发明(设计)人: | 李文鑫;曹志贱;吴英亮;曹路扬;樊拯 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/10;C07K7/08;A61K38/10;A61P31/04;A61P31/10 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 亚洲 雨林 抗菌 多肽 基因 制备 方法 应用 | ||
1.一种分离的蝎毒抗真菌多肽基因,其基因序列为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
2.一种分离的蝎毒抗真菌多肽蛋白质,其序列为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
3.权利要求1所述的一种蝎毒抗真菌多肽基因的制备方法,其步骤是:
A、构建亚洲雨林蝎毒腺组织cDNA文库,包括其毒腺用于总RNA的分离;取500mg的蝎尾腺在液氮中研成细粉末,通过Trizol方法制备的蝎毒腺总RNA;
B、通过(A)步骤制备的蝎毒腺总RNA量为3mg,采用PolyA Tract mRNA分离系统分离和纯化mRNA,紫外分光光度计测定其获得的蝎毒腺mRNA;
C、用5μgmRNA为起始量,进行cDNA的第一链和第二链合成;
D、继续双链cDNA与SalI衔接头的连接,NotI消化双链cDNA,去除双链cDNA分子中的过量SalI衔接头和酶切片段;
E、双链cDNA与pSPORT1载体的连接和转化,毒腺细胞cDNA文库的鉴定,从亚洲雨林蝎毒腺细胞cDNA文库中挑选2000克隆子测序,发现1404号克隆子为一种蝎毒抗菌肽基因。
4.权利要求1所述的一种蝎毒抗真菌多肽基因在制备治疗或预防真菌的药物中的应用。
5.权利要求1所述的一种蝎毒抗真菌多肽基因在制备治疗或预防革兰氏阳性菌的药物中的应用。
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