[发明专利]一种高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法

权利要求书

1.高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法，其步骤包括：

1)选取含有金属离子结合蛋白的待分离原料，沉淀离心去除脂类等杂质后收集上清液获得蛋白混合物；

2)在所得蛋白混合物中添加适量的蛋白结合金属离子；

3)选择不与蛋白结合金属离子沉淀的缓冲液作为离子交换层析缓冲液；

4)在离子交换层析缓冲液中添加适量的蛋白结合金属离子；

5)将蛋白混合物经过离子交换层析和凝胶过滤层析联用的组合层析，分离得到金属离子结合蛋白。

2.如权利要求1所述的方法，其中的待分离原料为转基因动物乳液、转基因工程菌的发酵液、转基因动物细胞的发酵液。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述的蛋白质是有金属离子结合能力的蛋白，如重组人源α-乳清白蛋白，牛源α-乳清白蛋白，重组人乳转铁蛋白等。

4.如权利要求1所述的方法，蛋白结合金属离子为钙离子、三价铁离子等。

5.如权利要求1所述的方法，离子交换层析所用的缓冲液为Tris-HCl缓冲液。

6.如权利要求1所述的方法，离子交换层析介质为常用的蛋白质层析介质，如琼脂糖基质的DEAE、Q、SP离子交换层析介质等。