[发明专利]一株产鼠李糖脂生物表面活性剂菌株及其生产的菌剂

权利要求书

1.一种产生鼠李糖脂类生物表面活性剂的菌株，该菌株KT2440-rhlABRI，是将铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)BSFD5中和鼠李糖脂类生物表面活性剂合成相关的基因簇rhlABRI，通过无标记同源重组的方法，整合到恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的模式菌株KT2440的染色体中而获得，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2010.5.28，保藏编号：CGMCC No.3875，分类命名：恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。

2.用权利要求1所述的菌株KT2440-rhlABRI生产的菌剂，是通过以下方法进行发酵生产而成的：

1)将菌株KT2440-rhlABRI接种于LB培养基摇瓶中，振荡培养至对数期，LB培养基配方为：酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 10g/L，加水补足体积，pH值7.0-7.2。

2)将上述培养好的菌种按体积比10％的接种量接种入1000升种子罐，培养至对数生长期，种子罐所用的培养基配方为：NaNO₃2.5g/L，K₂HPO₄4.0g/L，KH₂PO₄4.0g/L，CaCl₂·2H₂O 0.1g/L，MgSO₄0.2g/L，NaCl 1.0g/L，KCl 1.0g/L，酵母粉1.0g/L，甘油30g/L，加水补足体积，pH值7.0-7.2。

3)将种子液按生产罐培养基的10％接种量接入生产罐培养，生产罐所用培养基与种子罐培养基相同；

4)在种子罐和生产罐的培养过程中无菌空气的通气量为2∶0.6-1.2，搅拌速度为240-300转/分，培养温度为30-32℃，全流程培养时间为80-100小时，发酵结束后菌体数量达到5亿个/mL以上，发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶分装。