[发明专利]一种能用同源重组来克隆的枯草芽孢杆菌整合载体的构建及其应用无效
| 申请号： | 201010271750.4 | 申请日： | 2010-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN101948866A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 李晓明;韦航;廖东庆;蒙健宗;张云光;林珊宇;李丛;陈发忠;梁莲华 | 申请（专利权）人： | 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/66;C12N15/63 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 王素娥 |
| 地址： | 530003 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 能用 同源 重组 克隆 枯草 芽孢 杆菌 整合 载体 构建 及其 应用 | ||
1.一种能用同源重组来克隆外源DNA的枯草芽孢杆菌整合载体pMLK83-BN，其序列如下：
1 GTCGACGCCG ATTCATTAAT GCAGCTGGCA CGACAGGTTT CCCGACGGAT
51 CCTTTTCTCC TTACGCATCT GTGCGGTATT TCACACCGCA TAGCGGTGGC
101 GGCCGCTCTA GTTAAGGAGG TGATCTAGAA TTCATGGTCC GTCCTGTAGA
151 AACCCCAACC CGTGAAATCA AAAAACTCGA CGGCCTGTGG GCATTCAGTC
201 TGGATCGCGA AAACTGTGGA ATTGATCAGC GTTGGTGGGA AAGCGCGTTA
251 CAAGAAAGCC GGGCAATTGC TGTGCCAGGC AGTTTTAACG ATCAGTTCGC
301 CGATGCAGAT ATTCGTAATT ATGCGGGCAA CGTCTGGTAT CAGCGCGAAG
351 TCTTTATACC GAAAGGTTGG GCAGGCCAGC GTATCGTGCT GCGTTTCGAT
401 GCGGTCACTC ATTACGGCAA AGTGTGGGTC AATAATCAGG AAGTGATGGA
451 GCATCAGGGC GGCTATACGC CATTTGAAGC CGATGTCACG CCGTATGTTA
501 TTGCCGGGAA AAGTGTACGT ATCACCGTTT GTGTGAACAA CGAACTGAAC
551 TGGCAGACTA TCCCGCCGGG AATGGTGATT ACCGACGAAA ACGGCAAGAA
601 AAAGCAGTCT TACTTCCATG ATTTCTTTAA CTATGCCGGA ATCCATCGCA
651 GCGTAATGCT CTACACCACG CCGAACACCT GGGTGGACGA TATCACCGTG
701 GTGACGCATG TCGCGCAAGA CTGTAACCAC GCGTCTGTTG ACTGGCAGGT
751 GGTGGCCAAT GGTGATGTCA GCGTTGAACT GCGTGATGCG GATCAACAGG
801 TGGTTGCAAC TGGACAAGGC ACTAGCGGGA CTTTGCAAGT GGTGAATCCG
851 CACCTCTGGC AACCGGGTGA AGGTTATCTC TATGAACTGT GCGTCACAGC
901 CAAAAGCCAG ACAGAGTGTG ATATCTACCC GCTTCGCGTC GGCATCCGGT
951 CAGTGGCAGT GAAGGGCGAA CAGTTCCTGA TTAACCACAA ACCGTTCTAC
1001 TTTACTGGCT TTGGTCGTCA TGAAGATGCG GACTTGCGTG GCAAAGGATT
1051 CGATAACGTG CTGATGGTGC ACGACCACGC ATTAATGGAC TGGATTGGGG
1101 CCAACTCCTA CCGTACCTCG CATTACCCTT ACGCTGAAGA GATGCTCGAC
1151 TGGGCAGATG AACATGGCAT CGTGGTGATT GATGAAACTG CTGCTGTCGG
1201 CTTTAACCTC TCTTTAGGCA TTGGTTTCGA AGCGGGCAAC AAGCCGAAAG
1251 AACTGTACAG CGAAGAGGCA GTCAACGGGG AAACTCAGCA AGCGCACTTA
1301 CAGGCGATTA AAGAGCTGAT AGCGCGTGAC AAAAACCACC CAAGCGTGGT
1351 GATGTGGAGT ATTGCCAACG AACCGGATAC CCGTCCGCAA GGTGCACGGG
1401 AATATTTCGC GCCACTGGCG GAAGCAACGC GTAAACTCGA CCCGACGCGT
1451 CCGATCACCT GCGTCAATGT AATGTTCTGC GACGCTCACA CCGATACCAT
1501 CAGCGATCTC TTTGATGTGC TGTGCCTGAA CCGTTATTAC GGATGGTATG
1551 TCCAAAGCGG CGATTTGGAA ACGGCAGAGA AGGTACTGGA AAAAGAACTT
1601 CTGGCCTGGC AGGAGAAACT GCATCAGCCG ATTATCATCA CCGAATACGG
1651 CGTGTATACG TTAGCCGGGC TGCACTCAAT GTACACCGAC ATGTGGAGTG
1701 AAGAGTATCA GTGTGCATGG CTGGATATGT ATCACCGCGT CTTTGATCGC
1751 GTCAGCGCCG TCGTCGGTGA ACAGGTATGG AATTTCGCCG ATTTTGCGAC
1801 CTCGCAAGGC ATATTGCGCG TTGGCGGTAA CAAGAAAGGG ATCTTCACTC
1851 GCGACCGCAA ACCGAAGTCG GCGGCTTTTC TGCTGCAAAA ACGCTGGACT
1901 GGCATGAACT TCGGTGAAAA ACCGCAGCAG GGAGGCAAAC AATGAATCAA
1951 CAACTCTCCT GGCGCACCAT CGTCGGCTAC AGCCTCGGGA ATTCGATGGT
2001 CGAGATCAGG GAATGAGTTT ATAAAATAAA AAAAGCACCT GAAAAGGTGT
2051 CTTTTTTTGA TGGTTTTGAA CTTGTTCTTT CTTATCTTGA TACATATAGA
2101 AATAACGTCA TTTTTATTTT AGTTGCTGAA AGGTGCGTTG AAGTGTTGGT
2151 ATGTATGTGT TTTAAAGTAT TGAAAACCCT TAAAATTGGT TGCACAGAAA
2201 AACCCCATCT GTTAAAGTTA TAAGTGACTA AACAAATAAC TAAATAGATG
2251 GGGGTTTCTT TTAATATTAT GTGTCCTAAT AGTAGCATTT ATTCAGATGA
2301 AAAATCAAGG GTTTTAGTGG ACAAGACAAA AAGTGGAAAA GTGAGACCAT
2351 GAGCTTATGC TTAGGAAGAC GAGTTATTAA TAGCTGAATA AGAACGGTGC
2401 TCTCCAAATA TTCTTATTTA GAAAAGCAAA TCTAAAATTA TCTGAAAAGG
2451 GAATGAGAAT AGTGAATGGA CCAATAATAA TGACTAGAGA AGAAAGAATG
2501 AAGATTGTTC ATGAAATTAA GGAACGAATA TTGGATAAAT ATGGGGATGA
2551 TGTTAAGGCT ATTGGTGTTT ATGGCTCTCT TGGTCGTCAG ACTGATGGGC
2601 CCTATTCGGA TATTGAGATG ATGTGTGTCA TGTCAACAGA GGAAGCAGAG
2651 TTCAGCCATG AATGGACAAC CGGTGAGTGG AAGGTGGAAG TGAATTTTGA
2701 TAGCGAAGAG ATTCTACTAG ATTATGCATC TCAGGTGGAA TCAGATTGGC
2751 CGCTTACACA TGGTCAATTT TTCTCTATTT TGCCGATTTA TGATTCAGGT
2801 GGATACTTAG AGAAAGTGTA TCAAACTGCT AAATCGGTAG AAGCCCAAAC
2851 GTTCCACGAT GCGATTTGTG CCCTTATCGT AGAAGAGCTG TTTGAATATG
2901 CAGGCAAATG GCGTAATATT CGTGTGCAAG GACCGACAAC ATTTCTACCA
2951 TCCTTGACTG TACAGGTAGC AATGGCAGGT GCCATGTTGA TTGGTCTGCA
3001 TCATCGCATC TGTTATACGA CGAGCGCTTC GGTCTTAACT GAAGCAGTTA
3051 AGCAATCAGA TCTTCCTTCA GGTTATGACC ATCTGTGCCA GTTCGTAATG
3101 TCTGGTCAAC TTTCCGACTC TGAGAAACTT CTGGAATCGC TAGAGAATTT
3151 CTGGAATGGG ATTCAGGAGT GGACAGAACG ACACGGATAT ATAGTGGATG
3201 TGTCAAAACG CATACCATTT TGAACGATGA CCTCTAATAA TTGTTAATCA
3251 TGTTGGTTAC GTATTTATTA ACTTCTCCTA GTATTAGTAA TTATCAGAAT
3301 TGATCTGCGG CCGCGAATTA TCAAGCTCTG AGCGCCGGTC GCTACCATTA
3351 CCAGTTGGTC TGGTGTCAAA AATAATAATA ACCGGGCAGG CCATGTCTGC
3401 CCGTATTTCG CGTAAGGAAA TCCATTATGT ACTATTTAAT TCTGCGTGAC
3451 ATCCCATCGA TCAGACCAGT TTTTAATTTG TGTGTTTCCA TGTGTCCAGT
3501 TTGGAATACT CTTAACCTCA TTGGAAATCG CGGCATAATC ACTGGTGGTA
3551 TGATTGATGA CCGCGTCAAC AATGACCTTT ATGCCATATT CTTCAGCGGC
3601 TGCACACATT TCTTTAAATT CTTGTTCAGT ACCTAAGTAA CGGTTGCCAA
3651 TTTGATACGA TGTCGGCTGA TACAGCCAGT ACCAGTTCGA CATGCTTTTA
3701 TCTCCTTGAT TCCCTTCCTT TACTTGGTTA ATCGGAGATG TCTGAATGGC
3751 TGTATATCCT GCATCATGAA TATCCTTCAT ATTGTGTTTT AACGTATTGA
3801 ACGACCAATT CCATGCATGA AGAATGGTTC CGCTTTTGAT CGACGGTGCT
3851 GTAAGCTCAT TCGATTTGTT CGCCGTTTCA GCACTCGCAG CCGCCGGTCC
3901 TGCCAGAACC AAATGAAACA GCAATAAAAA TCCAGCGAAT AACGGCAGTA
3951 AAGAGGTTTT GAATCGTTTT GCAAACATTC TTGACACTCC TTATTTGATT
4001 TTTTGAAGAC TTACTTCGGA GTCAAAAATC CCTCTTACTT CATTCTTCCG
4051 CTTCCTCCTT TCAAACCGAT GTGAAGACTG GAGAATTTTG TTAATTCTTG
4101 AAGACGAAAG GGCCTCGTGA TACGCCTATT TTTATAGGTT AATGTCATGA
4151 TAATAATGGT TTCTTAGACG TCAGGTGGCA CTTTTCGGGG AAATGTGCGC
4201 GGAACCCCTA TTTGTTTATT TTTCTAAATA CATTCAAATA TGTATCCGCT
4251 CATGAGACAA TAACCCTGAT AAATGCTTCA ATAATATTGA AAAAGGAAGA
4301 GTATGAGTAT TCAACATTTC CGTGTCGCCC TTATTCCCTT TTTTGCGGCA
4351 TTTTGCCTTC CTGTTTTTGC TCACCCAGAA ACGCTGGTGA AAGTAAAAGA
4401 TGCTGAAGAT CAGTTGGGTG CACGAGTGGG TTACATCGAA CTGGATCTCA
4451 ACAGCGGTAA GATCCTTGAG AGTTTTCGCC CCGAAGAACG TTTTCCAATG
4501 ATGAGCACTT TTAAAGTTCT GCTATGTGGC GCGGTATTAT CCCGTATTGA
4551 CGCCGGGCAA GAGCAACTCG GTCGCCGCAT ACACTATTCT CAGAATGACT
4601 TGGTTGAGTA CTCACCAGTC ACAGAAAAGC ATCTTACGGA TGGCATGACA
4651 GTAAGAGAAT TATGCAGTGC TGCCATAACC ATGAGTGATA ACACTGCGGC
4701 CAACTTACTT CTGACAACGA TCGGAGGACC GAAGGAGCTA ACCGCTTTTT
4751 TGCACAACAT GGGGGATCAT GTAACTCGCC TTGATCGTTG GGAACCGGAG
4801 CTGAATGAAG CCATACCAAA CGACGAGCGT GACACCACGA TGCCTGCAGC
4851 AATGGCAACA ACGTTGCGCA AACTATTAAC TGGCGAACTA CTTACTCTAG
4901 CTTCCCGGCA ACAATTAATA GACTGGATGG AGGCGGATAA AGTTGCAGGA
4951 CCACTTCTGC GCTCGGCCCT TCCGGCTGGC TGGTTTATTG CTGATAAATC
5001 TGGAGCCGGT GAGCGTGGGT CTCGCGGTAT CATTGCAGCA CTGGGGCCAG
5051 ATGGTAAGCC CTCCCGTATC GTAGTTATCT ACACGACGGG GAGTCAGGCA
5101 ACTATGGATG AACGAAATAG ACAGATCGCT GAGATAGGTG CCTCACTGAT
5151 TAAGCATTGG TAACTGTCAG ACCAAGTTTA CTCATATATA CTTTAGATTG
5201 ATTTAAAACT TCATTTTTAA TTTAAAAGGA TCTAGGTGAA GATCCTTTTT
5251 GATAATCTCA TGACCAAAAT CCCTTAACGT GAGTTTTCGT TCCACTGAGC
5301 GTCAGACCCC GTAGAAAAGA TCAAAGGATC TTCTTGAGAT CCTTTTTTTC
5351 TGCGCGTAAT CTGCTGCTTG CAAACAAAAA AACCACCGCT ACCAGCGGTG
5401 GTTTGTTTGC CGGATCAAGA GCTACCAACT CTTTTTCCGA AGGTAACTGG
5451 CTTCAGCAGA GCGCAGATAC CAAATACTGT CCTTCTAGTG TAGCCGTAGT
5501 TAGGCCACCA CTTCAAGAAC TCTGTAGCAC CGCCTACATA CCTCGCTCTG
5551 CTAATCCTGT TACCAGTGGC TGCTGCCAGT GGCGATAAGT CGTGTCTTAC
5601 CGGGTTGGAC TCAAGACGAT AGTTACCGGA TAAGGCGCAG CGGTCGGGCT
5651 GAACGGGGGG TTCGTGCACA CAGCCCAGCT TGGAGCGAAC GACCTACACC
5701 GAACTGAGAT ACCTACAGCG TGAGCTATGA GAAAGCGCCA CGCTTCCCGA
5751 AGGGAGAAAG GCGGACAGGT ATCCGGTAAG CGGCAGGGTC GGAACAGGAG
5801 AGCGCACGAG GGAGCTTCCA GGGGGAAACG CCTGGTATCT TTATAGTCCT
5851 GTCGGGTTTC GCCACCTCTG ACTTGAGCGT CGATTTTTGT GATGCTCGTC
5901 AGGGGGGCGG AGCCTATGGA AAAACGCCAG CAACGCGGCC TTTTTACGGT
5951 TCCTGGCCTT TTGCTGGCCT TTTGCTCACA TGTTCTTTCC TGCGTTATCC
6001 CCTGATTCTG TGGATAACCG TATTACCGCC TTTGAGTGAG CTGATACCGC
6051 TCGCCGCAGC CGAACGACCG AGCGCAGCGA GTCAGTGAGC GAGGAAGCGG
6101 AAGAGCGCCT GATGCGGTAT TTTCTCCTTA CGCATCTGTG CGGTATTTCA
6151 CACCGCATAT GGTGCACTCT CAGTACAATC TGCTCTGATG CCGCATAGTT
6201 AAGCCAGTAT ACACTCCGCT ATCGCTACGT GACTGGGTCA TGGCTGCGCC
6251 CCGACACCCG CCAACACCCG CTGACGCGCC CTGACGGGCT TGTCTGCTCC
6301 CGGCATCCGC TTACAGACAA GCTGTGACCG TCTCCGGGAG CTGCATGTGT
6351 CAGAGGTTTT CACCGTCATC ACCGAAACGC GCGAGGCAGC TGCGGTAAAG
6401 CTCATCAGCG TGGTCGTGAA GCGATTCACA GATGTCTGCC TGTTCATCCG
6451 CGTCCAGCTC GTTGAGTTTC TCCAGAAGCG TTAATGTCTG GCTTCTGATA
6501 AAGCGGGCCA TGTTAAGGGC GGTTTTTTCC TGTTTGGTCA CTGATGCCTC
6551 CGTGTAAGGG GGATTTCTGT TCATGGGGGT AATGATACCG ATGAAACGAG
6601 AGAGGATGCT CACGATACGG GTTACTGATG ATGAACATGC CCGGTTACTG
6651 GAACGTTGTG AGGGTAAACA ACTGGCGGTA TGGATGCGGC GGGACCAGAG
6701 AAAAATCACT CAGGGTCAAT GCCAGCGCTT CGTTAATACA GATGTAGGTG
6751 TTCCACAGGG TAGCCAGCAG CATCCTGCGA TGCAGATCCG GAACATAATG
6801 GTGCAGGGCG CTGACTTCCG CGTTTCCAGA CTTTACGAAA CACGGAAACC
6851 GAAGACCATT CATGTTGTTG CTCAGGTCGC AGACGTTTTG CAGCAGCAGT
6901 CGCTTCACGT TCGCTCGCGT ATCGGTGATT CATTCTGCTA ACCAGTAAGG
6951 CAACCCCGCC AGCCTAGCCG GGTCCTCAAC GACAGGAGCA CGATCATGCG
7001 CACCCGTGGC CAGGACCCAA CGCTGCCCGA GATGCGCCGC GTGCGGCTGC
7051 TGGAGATGGC GGACGCGATG GATATGTTCT GCCAAGGGTT GGTTTGCGCA
7101 TTCACAGTTC TCCGCAAGAA TTGATTGGCT CCAATTCTTG GAGTGGTGAA
7151 TCCGTTAGCG AGGTGCCGCC GGCTTCCATT CAGGTCGAGG TGGCCCGGCT
7201 CCATGCACCG CGACGCAACG CGGGGAGGCA GACAAGGTAT AGGGCGGCGC
7251 CTACAATCCA TGCCAACCCG TTCCATGTGC TCGCCGAGGC GGCATAAATC
7301 GCCGTGACGA TCAGCGGTCC AATGATCGAA GTTAGGCTGG TAAGAGCCGC
7351 GAGCGATCCT TGAAGCTGTC CCTGATGGTC GTCATCTACC TGCCTGGACA
7401 GCATGGCCTG CAACGCGGGC ATCCCGATGC CGCCGGAAGC GAGAAGAATC
7451 ATAATGGGGA AGGCCATCCA GCCTCGCGTC GCGACTAAGA AAATGCCGTC
7501 AAATCCGCTC GCCATGACTT CACTAACGAT GCCTTTGAAA ATCTTCAAGT
7551 TCTTTTCTAC TAATTCAAGG CGTGTCTCAC CAGGTTTTTG GTTTGCTCCG
7601 GCGCAAATGC AGACAATATC AGCATCCTTG CAGGGTATGT TTCTCTTTGA
7651 TGTCTTTTTG TTTGTGAAGT ATTTCACATT TATATTGTGC AACACTTCAC
7701 AAACTTTTGC AAGAGAAAAG TTTTGTCTGA TTTATGAACA AAAAAGAAAC
7751 CATCATTGAT GGTTTCTTTC GGTAAGTCCC GTCTAGCCTT GCCCTCAATG
7801 GGGAAGAGAA CCGCTTAAGC CCGAGTCATT ATATAAACCA TTTAGCACGT
7851 AATCAAAGCC AGGCTGATTC TGACCGGGCA CTTGGGCGCT GCCATTATTA
7901 AAAATCACTT TTGCGTTGGT TGTATCCGTG TCCGCAGGCA GCGTCAGCGT
7951 GTAAATTCCG TCTGCATTTT TAGTCATTGG TTTTCCAGGC CAAGATCCGG
8001 TCAATTCAAT TACTCGGCTC CCATCATGTT TATAGATATA AGCATTTACC
8051 TGGCTCCAAT GATTCGGATT TTGATAGCCG ATGGTTTTGG CCGACGCTGG
8101 ATCTCTTTTA ACAAAACTGT ATTTCTCGGT CCTCGTTACA CCATCACTGT
8151 TCGTTCCTTT TAACATGATG GTGTATGTTT TGCCAAATTG GATCTCCTTT
8201 TCCGATTGTG AATTGATCTC CATCCTTAAA CGCCTGTCGT CTGGTCCATT
8251 ATTGATTTGA TAAACGGCTT TTGTTGTATT CGCATCTGCA CGCAAGGTAA
8301 TCGTCAGTTG ATCATTGAAA GAATGTGTTA CACCTGTTTT GTAATTCTCA
8351 AGGAAAACAT GAGGCGCTTT TGCAATATCA TCAGGATAAA GCACAGCTAC
8401 AGACCTGGCA TTGATCGTGC CTGTCAGTTT ACCATCGTTC ACTTGAAATG
8451 AACCCGCTCC AGCTTTATTG TCATACCTGC CATCAGGCAA TTTTGTTGCC
8501 GTATTGATAG AGACAGAGGA TGAACCTGCA TTTGCCAGCA CAACGCCATG
8551 TGAGCCGCGC TGATTCATAA ATATCTGGTT GTTTCCATTC GGGTTCGAGA
8601 GTTCCTCAGG CTGTCCAGCC ATCACATTGT GAAATCTATT GACCGCAGTG
8651 ATAGCCTGAT CTTCAAATAA AGCACTCCCG CGATCGCCTA TTTGGCTTTT
8701 CCCCGGGAAC CTCACACCAT TTCCGCCTCC CTCAGGTCTG GAAAAGAAAA
8751 GAGGCGTACT GCCTGAACGA GAAGCTATCA CCGCCCAGCC TAAACGGATA
8801 TCATCATCGC TCATCCAT
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