[发明专利]筛选鼠李糖脂产生菌的方法及所用培养基

权利要求书

1.一种用于筛选鼠李糖脂产生菌的培养基，该培养基中是以液体石蜡为碳源，并添加绿脓素作为抑制剂。

2.根据权利要求1所述的培养基，该培养基为液体培养基，其中，液体石蜡的含量为5～15g/L，绿脓素的含量为5～15g/L。

3.根据权利要求1所述的培养基，该培养基中包括：NaNO₃ 2～4g/L，Na₂HPO₄ 1～2g/L，MgSO₄·7H₂O 0～1g/L，NaCl 0～5g/L，酵母粉0～1g/L，液体石蜡5～15g/L，绿脓素5～15g/L，pH 7.2～7.5。

4.权利要求1～3任一项所述的培养基在用于筛选鼠李糖脂产生菌中的应用。

5.一种筛选鼠李糖脂产生菌的方法，其中应用权利要求1～3任一项所述的培养基作为富集培养基。

6.根据权利要求5所述的筛选鼠李糖脂产生菌的方法，该方法包括步骤：

a.以油田油藏地层水作为菌种筛选源，接种于权利要求1～3任一项所述的培养基中，30～38℃培养100～200h，得到菌种培养液；

b.将步骤a中得到的菌种培养液涂布于溶血琼脂平板培养基或LB琼脂平板培养基上，34～37℃培养24～48h，根据菌落形态挑选菌种。

7.根据权利要求6所述的筛选鼠李糖脂产生菌的方法，其中，所述步骤a中油田油藏地层水与权利要求1～3任一项所述的培养基的接种比例为1∶4～10(v/v)。

8.根据权利要求6所述的筛选鼠李糖脂产生菌的方法，其中，挑选具有以下菌落形态的菌种：

同形态菌落数居多或者溶血圈大；菌落灰褐色，偏平，边缘不整齐，且常呈相互融合状态；菌落周围有水溶性色素，使培养基被染成蓝绿色或黄绿色；菌落有金属光泽或者有生姜气味。

9.根据权利要求6所述的筛选鼠李糖脂产生菌的方法，该方法还包括步骤：

c.将步骤b中挑选的菌种接入发酵培养基中进行发酵培养，采用排油圈法、表面张力SF测量及EL24测量，选择表面活性高的菌种；和/或进行16S rDNA分析鉴定菌种的种属；所述发酵培养基为权利要求1～3任一项所述的培养基，或是以植物油、石油烃或是废弃油为碳源的培养基。

10.按照权利要求5～9任一项所述的方法筛选得到的鼠李糖脂产生菌，优选地，该鼠李糖脂产生菌为保藏编号为CGMCC No.4002的铜绿假单胞菌。