[发明专利]一种高纯度两性霉素B的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度两性霉素B的制备方法，包括下述步骤：

1)在两性霉素B发酵液中加入酸性物质和助滤剂，搅拌；

2)固液分离，得两性霉素B菌丝体；

3)加入醇和碱水，搅拌；

4)固液分离，得两性霉素B提取液；

5)膜超滤，得净化液；

6)调节pH值≤7.0，析出两性霉素B结晶；

7)固液分离，得两性霉素B结晶粉。

2.根据权利要求1的方法，包括下述步骤：

1)在常温条件下，在两性霉素B发酵液中加入酸性物质，调节pH值至2.0-4.0，加入助滤剂，搅拌30分钟-2小时；

2)固液分离，得到两性霉素B菌丝体；

3)5-30℃条件下，在两性霉素B菌丝体中加入质量百分比为40-80％的醇和pH值为9.0-12.0的碱水，搅拌1-3小时；

4)固液分离，得到两性霉素B提取液；

5)将两性霉素B提取液通过截留分子量为5000-30000Da的膜超滤，除去热源、杂蛋白和色素等大分子量杂质后得到净化液；

6)常温下，用酸调节净化液pH值至4.5-7.0，析出两性霉素B结晶；

7)固液分离两性霉素B结晶，得到两性霉素B结晶粉。

3.根据权利要求2的方法，其中步骤1)所述酸性物质为有机酸或无机酸。

4.根据权利要求3的方法，其中有机酸为草酸或乙酸，无机酸为盐酸。

5.根据权利要求2的方法，其中步骤1)所述助滤剂为珍珠岩或硅藻土，用量为2-10％(W/V)。

6.根据权利要求2的方法，其中步骤3)所述醇为甲醇或乙醇，所述碱水的量为菌丝重的2-6倍(V/W)，所述碱为氢氧化钾、氢氧化钠或有机碱。

7.根据权利要求2的方法，其中步骤3)所述醇和碱水加入时的温度为5-30℃。

8.根据权利要求2的方法，其中步骤5)所述膜为陶瓷膜、不锈钢膜、中空纤维膜或其他材质的膜组件。

9.根据权利要求2的方法，其中步骤6)所述酸为盐酸、磷酸或有机酸。

10.根据权利要求2的方法，其中步骤7)所述的经固液分离得到两性霉素B结晶粉后，用真空干燥的方式在40-60℃条件下干燥至水分介于2.0-5.0％，得到高纯度两性霉素B。