[发明专利]杨桃细菌性斑点病原细菌分子检测引物及其检测方法无效
| 申请号： | 201010275167.0 | 申请日： | 2010-09-08 |
| 公开（公告）号： | CN101935708A | 公开（公告）日： | 2011-01-05 |
| 发明（设计）人： | 陈庆河;翁启勇;林静;李本金;兰成忠 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350013 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 杨桃 细菌性 斑点 病原 细菌 分子 检测 引物 及其 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种杨桃细菌性斑点病原细菌分子检测引物，其特征在于：所述引物序列为：
上游引物 PSaveF: 5'----CTTATCGACGACTCAGCTGCG----3'
下游引物 PSaveR: 5'----TCATGCGTTGATCGTCAGGATC----3'。
2.一种利用权利要求1所述引物检测杨桃细菌性斑点病菌的方法，包括：
（1）采用酚、氯仿法从植物组织的叶片或果实中提取DNA；
（2）PCR扩增：以提取的DNA为模板进行PCR扩增；PCR反应体系25ul，包括2.5ul 10×PCR反应缓冲液，25mM Mg2+ 2ul，2.5mM dNTPs 2ul, 0.5U Taq DNA聚合酶，10uM引物PSaveF / PSaveR各0.4ul和10ng模板DNA, d.d.H2O补足25ul；PCR反应条件为: 95℃ 预变性3min； 94℃变性 1min, 60℃退火 30 sec ,72℃延伸45 sec 共30个循环；72 ℃延伸10 min；
（3）然后取PCR产物用琼脂糖电泳分离，经溴化乙锭染色后于紫外灯下根据扩增产物的大小判定结果；
（4）如果能特异性地扩增出373bp产物，即能判断所述的植物组织样品中存在杨桃细菌性斑点病菌。
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