[发明专利]一种食品级藻蓝蛋白及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生化分离纯化技术领域，特别涉及一种藻蓝蛋白的分离纯化方法。

背景技术

螺旋藻是微藻中的蓝藻，它具有高蛋白、低脂肪、低糖、低胆固醇的特点，含有多种维生素、蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质和微量元素，而且各种比例科学合理，其中很多成分达到药物的含量和强度，使它的药用功能十分广泛，在促进人体新陈代谢，提高机体免疫力，提高身体素质，抗辐射，辅助癌症放、化疗，降低放疗、化疗副作用等多方面都有积极作用，是一种理想的纯天然生物活性健康食品。

藻胆蛋白是由脱辅基蛋白和藻蓝素(开链的四毗咯发色团)通过一个或两个硫醚键共价连接而成的结(缀)合蛋白。每种藻胆蛋白由等摩尔量的α和β亚基构成，α亚基的大小约为13kD～20kD，β亚基约为14kD～24kD。藻蓝蛋白的α亚基含1个藻蓝素，β亚基含2个藻蓝素，而别藻蓝蛋白的每个亚基中皆只有1个藻蓝素。螺旋藻藻胆蛋白能够刺激机体免疫系统产生免疫球蛋白，保持或促进正常的细胞功能，全面增强机体的防病、抗病能力，可防止肿瘤或抑制肿瘤的生长和复发，具有抗肿瘤的功效；它还是一种天然色素，可以取代人工合成色素，用作食品和化妆品等方面，是理想安全的添加剂。螺旋藻藻胆蛋白中所含的藻蓝蛋白含量高达17％，是植物中之最。

藻蓝蛋白是一种纯天然色素，可用作食物色素，也可用于化妆品工业，不会对人造成伤害，是安全的添加剂，同时，藻蓝蛋白也是活性物质，能极大地提高淋巴系统的免疫功能，增强免疫细胞活力，杀伤癌细胞。目前，可从数种海藻中提取藻蓝蛋白，但高纯度的藻蓝蛋白价格十分昂贵，且价格还在迅速上涨。

传统的螺旋藻藻蓝蛋白制备方法一般包括反复冻融，冷冻离心，硫酸按盐析，透析，上柱脱盐，多次梯度洗脱，冷冻干燥等，工艺繁琐、得率低、成本高，价格昂贵，并且无法大量制备，严重限制了螺旋藻藻蓝蛋白制品的推广使用。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种生产成本低，简单有效，并且适合大量制备食品级藻蓝蛋白的方法。

为实现上述目的，本发明提供了一种食品级藻蓝蛋白制备方法，包括如下步骤：

A.螺旋藻粉破壁；

B.向破壁后的螺旋藻粉中加入弱酸盐缓冲液浸提；

C.将螺旋藻粉浸提液进行固液分离，并提取上清液；

D.过滤所述上清液，得到粗提液；

E.纯化所述粗提液，得到浓缩液；

F.将所述浓缩液喷雾干燥。

进一步地，步骤A是先将螺旋藻粉和4℃磷酸盐缓冲液投入到混合颗粒机中湿混，湿混完毕后，通过5-16目尼龙网摇摆颗粒机制成颗粒，再用胶体磨循环研磨。

进一步地，磷酸盐缓冲溶液为0.01～0.05M，pH6.0～7.0。

进一步地，步骤B中的弱酸盐缓冲液为0.01～0.05M，pH6.0～7.0的磷酸盐缓冲溶液。

进一步地，步骤C是将所述螺旋藻粉浸提液依次进行转速为5000-8000转/分的卧式离心和转速为8000-12000转/分的管式离心。

进一步地，步骤D是将上清液依次通过200-500目的袋式过滤和0.22-0.45微米的平板过滤，得到粗提液。这样，可以使浸提液与细胞碎片有效分离，制得粗提液。

进一步地，步骤E是将粗提液依次用300-200KD、100-50KD两级超滤分级纯化，得到浓缩液。通过超滤纯化，可以充分洗出杂蛋白。

进一步地，步骤F中的喷雾干燥的进风温度为180-220℃，出风温度为60-90℃。

本发明的另一个目的在于提供一种成本低，产量大，适合工业化应用的食品级藻蓝蛋白。

为实现上述目的，本发明提供了一种依据上述方法制备的食品级藻蓝蛋白。

进一步地，该食品级藻蓝蛋白的纯度(OD₆₂₀/OD₂₈₀)大于1.0，并且其中藻蓝蛋白的含量大于50％，别藻蓝蛋白的含量大于10％，藻红蛋白的含量大于2％，其他蛋白的含量小于2％。