[发明专利]Exendin-4类似物的定位聚乙二醇化修饰物及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及Exendin-4类似物的定位聚乙二醇化修饰物，其制备方法、含它们的药物组合物、其修饰前体及其在治疗II型糖尿病等疾病中的用途。

背景技术

Exendin-4是一种从南美产毒蜥(Gila monster；Heloderma suspectum)的唾液分泌物中分离和鉴定出的天然产物。其序列为His¹-Gly-Glu-Gly-Thr⁵-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu¹⁰-Ser-Lys-Gln-Met-Glu¹⁵-Glu-Glu-Ala-Val-Arg²⁰-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp²⁵-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly³⁰-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala³⁵-Pro-Pro-Pro-Ser³⁹-NH₂的三十九肽，Exendin-4是胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)的类似物。是GLP-1受体激动剂，能激活GLP-1受体，具有控制甘油酯、促进胰岛素分泌、降低循环胰高血糖素、提高胰β-细胞质量、抑制胃的排空、减少营养的摄入、增加胰岛素敏感性等生物活性。Exendin-4可模拟体内自然分泌的激素，从而帮助人体调节血糖水平，而且在患者不需要的时候，就会停止该作用。Exendin-4的另一特点是可以恢复制造胰岛素的β细胞的第1时相分泌。第1时相分泌指的是由摄取食物而引发的胰岛素分泌，而对于II-型糖尿病患者而言，在患病初期就已经丧失了该反应能力。Exendin-4不但能够降低血糖，而且还能加强正在丧失功能的细胞机能，对II-型糖尿病治疗而言是一项重大进步。

Exendin-4于2005年4月获美国FDA批准，用于改善使用二甲双胍和磺酰脲类药物不理想的II型糖尿病患者的血糖控制。临床结果显示，Exendin-4用于糖尿病治疗效果明显，且副反应较小，但是每天两次的皮下给药给病人带来很多不便。

Exendin-4的效能及其内在独特的血糖依赖性作用机制使其更适宜制成缓释制剂，Amylin公司于2000年5月又和Alkennes公司签约合作开发品缓释型注射剂Exendin-4LAR，目前已完成II期临床试验，结果显示，15周后该药物的两种剂量水平都能很好耐受，并且Exendin-4的血药浓度均达到了预期的治疗范围。同时由于Exendin-4在II-糖尿病治疗机理方面具有明显优势，开发其长效类似物也是很多国外制药公司研发热点之一。

研究表明，多肽类药物经聚乙二醇(PEG)修饰后仍能保持好的生物活性，并能显著延长生物体内的半衰期。目前，已有对Exendin-4进行PEG修饰的研究报道，分别得到的三个位点His¹、Lys¹²、Lys²⁷的氨基PEG修饰产物，在大鼠的代谢研究中发现，代谢半衰期远长于Exendin-4(Jin Zhou等，Eur.J Pharma.Biopharm.，2009，72：412-417)。此外，还报道了对Exendin-4中Lys¹²和Lys²⁷的ε-氨基进行脂肪酸或石胆酸或透明质酸修饰，分别得到单修饰和双修饰的修饰物(Su Young Chae等，J Control.Release，2010，144(1)：10-16；JControl.Release，2010，142：206-213；Biomaterials，2010，31：4121-4128)。

然而，本领域技术人员理解，不论是用PEG对Exendin-4进行修饰，还是用脂肪酸、石胆酸或透明质酸对Exendin-4进行修饰，均存在修饰位点专一性较差的问题，从而可能造成产物呈不同单位点修饰物共存的混合物形式，或者可能造成产物呈不同多位点修饰物共存的混合物形式，这对于后续的制药应用是不利的。

因此，仍然期望提供一种可以对Exendin-4定位修饰并仍然保持Exendin-4生物学活性的方法以及Exendin-4修饰物例如PEG修饰物，以克服目前对Exendin-4进行修饰例如PEG化修饰时专一性差的问题。

发明内容