[发明专利]耐药基因PCR检测阳性对照模板、制备方法及试剂盒

权利要求书

1.一种耐药基因PCR检测阳性对照模板序列，所述耐药基因为NDM-1，所述序列含有SEQ ID NO：3所示的序列。

2.如权利要求1所述的耐药基因PCR检测阳性对照模板序列，其特征在于：所述序列含有SEQ ID NO：2所示的序列。

3.一种耐药基因PCR检测阳性对照模板的制备方法，所述耐药基因为NDM-1，NDM-1基因序列为SEQ ID NO：1所示的序列，其特征在于：包括如下步骤：

a)对NDM-1基因序列进行点突变，获取突变基因，所述突变基因序列含有SEQ ID NO：3所示的序列；

b)将所述突变基因合成并克隆入质粒；

c)将所述质粒线性化，得到所述阳性模板。

4.如权利要求3所述的耐药基因PCR检测阳性对照模板的制备方法，其特征在于：所述步骤a)中，插入一段多克隆位点。

5.如权利要求4所述的耐药基因PCR检测阳性对照模板的制备方法，其特征在于：所述多克隆位点包括多个内切酶酶切位点，所述酶切位点选自：BamHI、EcoRI、HindIII。

6.如权利要求3-5中任意一项所述的耐药基因PCR检测阳性对照模板的制备方法，其特征在于：所述步骤c)中，将所述质粒线性化后，再将所述质粒去磷酸化。

7.一种权利要求1或2所述的阳性对照模板在NDM-1检测上的应用。

8.一种耐药基因PCR检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1或2所述的阳性对照模板。

9.一种权利要求7所述的试剂盒在NDM-1检测上的应用。

10.一种引物，所述引物用于检测一种耐药基因PCR检测阳性对照模板序列，所述引物含有下述至少一组：

A：NDM-P1-L：CGACAACGCATTGGCATAAG  SEQ ID NO：7

   NDM-P1-R：CTGGCAGCACACTTCCTATC  SEQ ID NO：8

B：NDM-P2-L：GGCGGAATGGCTCATCAC    SEQ ID NO：9

   NDM-P2-R：GGCAGCACACTTCCTATCTC  SEQ ID NO：10

C：NDM-P3-L：GATTGCCGAGCGACTTGG    SEQ ID NO：11

   NDM-P3-R：CTGAGCACCGCATTAGCC    SEQ ID NO：12