[发明专利]一种鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记及其获取方法和应用

权利要求书

1.一种鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记，其特征在于所述耐热性相关分子标记为A+258G和C+1437T。

2.权利要求1所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）鸡基因组DNA的提取；

（2）设计2对特异性引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示，进行PCR扩增；

（3）扩增产物分型，A+258G位点利用PCR产物测序分型，C+1437T位点利用酶切分型。

3.根据权利要求2所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于步骤（1）中所述鸡血为抗凝血，抗凝剂为EDTA或肝素钠。

4.根据权利要求2所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于步骤（1）中所述提取是用苯酚-氯仿抽提法或试剂盒抽提。

5.根据权利要求2所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于步骤（2）中所述PCR扩增的反应体系为：Mix占反应体系的50体积%，上游引物和下游引物各10~20pmol，Taq酶占反应体系的0.75体积%，基因组DNA0.1~1ug，加灭菌双蒸水至反应总体积。

6.根据权利要求2所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于步骤（2）中所述PCR扩增的反应程序为：

。

7.根据权利要求2所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在于步骤（3）中所述酶切分型的酶切反应体系为：PCR产物8~10μL，内切酶3~5U，10×缓冲液为内切酶体积的2倍，37℃水浴过夜，用2.5%的琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，根据电泳条带判断个体的基因型，位点C+1437T酶切产物检测到三种基因型，其中TT基因型为一条371bp的条带；CC基因型为两条分别为193bp和178bp的条带；CT基因型为三条分别为371bp、193bp和178bp的条带。

8.根据权利要求7所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的获取方法，其特征在所述内切酶为Tsp45Ⅰ。

9.权利要求1所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记的应用，其特征在于所述鸡热应激蛋白70基因上的耐热性相关分子标记通过遗传育种，增强鸡对高温的耐受力。