[发明专利]木芙蓉总黄酮中黄酮类化合物的检测方法

权利要求书

1.一种木芙蓉总黄酮中黄酮类化合物的检测方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：

步骤1，

供试品溶液的制备：

称取木芙蓉总黄酮0.5g，精密称定后加入蒸馏水适量，超声溶解，功率为200w，频率为40kHz，时间为10min；然后用水稀释至50ml，加入沸点60℃-90℃石油醚萃取三次，每次50ml，石油醚液弃去，水液中再加入乙酸乙酯萃取三次，每次50ml，合并乙酸乙酯液并减压蒸干，残渣加甲醇溶解，定容至50ml，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；

对照品溶液的制备：

精密称取芦丁、金丝桃苷、槲皮苷对照品适量，加甲醇制成每1mL分别含40.0μg、32.2μg、28.0μg的混合溶液，即得；

采用的检测仪器：高效液相色谱仪、紫外检测器；

采用的色谱检测条件：按照中国药典2005版一部附录VI D高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：XBridge Shield RP18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相梯度为：

在0-10分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为85∶15，

在10-15分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为82∶18，

在15-20分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为81∶19，

在20-25分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为80∶20，

在25-28分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为79∶21，

在28-31分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为78∶22，

在31-33分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为77∶23，

在33-36分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为76∶24，

在36-38分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为75∶25，

在38-45分钟，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为68∶32，

在45分钟后，流速1.0ml/min，水与乙腈体积比为65∶35；

检测波长370nm或254nm；进样量20μL，理论塔板数按槲皮苷计算应不低于3000；

步骤2，

按照步骤1制得的供试品溶液、对照品溶液在步骤1的色谱检测条件下注入高效液相色谱仪进行检测，根据槲皮苷的峰面积计算槲皮苷在总黄酮中所占的含量，根据供试品溶液的各个峰的出峰时间定性检测出芦丁与金丝桃苷。