[发明专利]检测中药注射液中高分子量物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体说是涉及一种检测中药注射液中高分子量物质的方法。

背景技术

含有高分子量物质的中药注射液产品，从安全性角度考虑，患者在应用时需要进行皮试试验。但是皮试试验仅能对速发型I型变态反应有预测作用，且阳性符合度仅30％，即使皮试试验呈阴性也不能说明以后不发生过敏反应，这是皮试试验无法预测的。因此，为了确保临床用药的安全有效，对中药注射液产品中高分子量物质的含量进行检测，对可能带入的高分子量物质进行有效地监控，从源头上控制临床过敏反应的发生，既可以节约宝贵的临床急救时间，同时也增加了临床医护人员与患者的便利性，减轻了患者的用药痛苦，具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的缺陷，提供一种简便易行、耗费少、时间短、准确性和重现性都很好的检测中药注射液中高分子量物质的凝胶色谱检测方法。

本发明的目的是通过以下方案来实现的：一种检测中药注射液中高分子量物质的方法，该方法包括下列步骤：

a、对照溶液的制备：取胸腺素α、人生长激素释放抑制因子2种溶液各2ml，置于25ml容量瓶中，加水稀释并定容至刻度；再取上述各容量瓶中溶液2.5ml，分别用量瓶定容至25ml，即得对照溶液；

b、供试品溶液的制备：取供试品中药注射液30ml加入超滤离心管中，在6000r/min下离心10min，取残留物定容至1ml即得供试品溶液；

c、检测：分别精密吸取供试品溶液和对照溶液注入高效液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定各溶液的色谱，记录供试品溶液色谱图和对照溶液色谱图，测定供试品溶液中分子量大于对照溶液中高分子量物质的物质的含量作为供试品溶液中高分子量物质的含量；

d、测量最低检出限：取对照溶液分别依次进样20μl、15μl、10μl，可发现在进样10μl核糖核酸酶A的峰高与基线噪音的比例约为4∶1，即得最低检出限为0.07μg。

上述步骤中高效液相色谱的条件为：色谱柱为凝胶色谱柱TSK G2000 SWxl柱；流动相为乙腈-0.83％三氟乙酸溶液(40∶60)；检测波长为214土lnm；流速0.70～0.85ml/min。

所述供试品溶液色谱图中，各个峰的保留时间均大于对照溶液主峰的保留时间。

本发明的优点在于：本发明简便易行、耗费少、时间短、准确性和重现性都很好，可以确保临床用药的安全有效，对中药注射液产品中高分子量物质的含量进行检测，对可能带入的高分子量物质进行有效地监控，从源头上控制临床过敏反应的发生，既可以节约宝贵的临床急救时间，同时也增加了临床医护人员与患者的便利性，减轻了患者的用药痛苦，具有非常重要的意义。本发明采用TSK G2000 SWxl型凝胶柱对中药注射液中的高分子物质进行检测，结果在进样体积20μl，检出限为0.08μg下未能检出大分子物质，说明本发明建立了一套完整的高分子物质检测方法。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。

实施例1：一种检测中药注射液中高分子量物质的方法，该方法包括下列步骤：a、对照溶液的制备：取核糖核酸酶A、人胰岛素、胸腺素α、人生长激素释放抑制因子4种溶液各1ml，置于25ml容量瓶中，加水稀释并定容至刻度；再取上述各容量瓶中溶液2.5ml，分别用量瓶定容至25ml，即得对照溶液；b、供试品溶液的制备：取供试品中药注射液20ml加入超滤离心管中，在6000r/min下离心10min，取残留物定容至1ml即得供试品溶液；c、检测：分别精密吸取供试品溶液和对照溶液注入高效液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定各溶液的色谱，记录供试品溶液色谱图和对照溶液色谱图，测定供试品溶液中分子量大于对照溶液中高分子量物质的物质的含量作为供试品溶液中高分子量物质的含量；d、测量最低检出限：取对照溶液分别依次进样25μl、20μl、15μl、10μl、5μl，可发现在进样10μl核糖核酸酶A的峰高与基线噪音的比例约为3∶1，即得最低检出限为0.04μg。上述步骤中高效液相色谱的条件为：色谱柱为凝胶色谱柱TSK G2000SWxl柱；流动相为乙腈-0.83％三氟乙酸溶液(40∶60)；检测波长为214土lnm；流速0.70～0.75ml/min；所述供试品溶液色谱图中，各个峰的保留时间均大于对照溶液主峰的保留时间。

表1为最低检出限中的各对照出峰时间及其分子量：

表1各对照品分子量及出峰时间

综上所述本实施例不过是本发明的优选实施方案，不可理解为对本发明保护范围的限定，对于该领域的技术工作人员根据本发明本实施例所做的不超出本发明技术方案的调整和改动，应该认为落在本发明的保护范围内。