[发明专利]一种泥鳅霍乱弧菌疫苗的制备方法无效
| 申请号： | 201010290135.8 | 申请日： | 2010-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN102100909A | 公开（公告）日： | 2011-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张晓君;秦国民;姚东瑞 | 申请（专利权）人： | 淮海工学院 |
| 主分类号： | A61K39/106 | 分类号： | A61K39/106;A61K39/39;A61P31/04 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222006 江苏省连云港市新*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 泥鳅 霍乱弧菌 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种泥鳅霍乱弧菌疫苗的制备方法，其特征在于：它以泥鳅病原霍乱弧菌LD081008B-1(Vibrio cholerae LD081008B-1)为免疫原，以黄芪浸出液为佐剂；其制备方法步骤如下：
(1)将霍乱弧菌LD081008B-1菌株接种在普通营养肉汤培养基上，28-30℃培养18-24h后，加入体积终浓度0.3％的甲醛28-30℃灭活48h，得灭活菌体；
(2)取黄芪用蒸馏水浸泡30-60min后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药1g/mL，得黄芪浸出液；
(3)将灭活菌体与黄芪浸出液混合，制得水剂型黄芪佐剂泥鳅霍乱弧菌疫苗；二者的混合比例为：每毫升黄芪浸出液中加入的灭活菌体为3.2×108cells。
2.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅霍乱弧菌疫苗的使用方法，其特征在于：它采用浸泡免疫的方法，先将受免泥鳅在充气条件下用质量浓度为8％的NaCl溶液浸泡5min，然后按体积比1∶5用水稀释泥鳅霍乱弧菌疫苗得泥鳅霍乱弧菌疫苗溶液，再将受免泥鳅放于泥鳅霍乱弧菌疫苗溶液中充气浸泡1h，一周后按前述方法加强免疫1次。
3.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅霍乱弧菌疫苗的使用方法，其特征在于：它采用注射免疫的方法，取体长为8-12cm的泥鳅按0.1mL/尾的免疫剂量进行初次注射免疫，后每隔一周按前述免疫剂量加强免疫1次，共免疫4次。
4.一种如权利要求1所述的制备方法所制得的泥鳅霍乱弧菌疫苗的使用方法，其特征在于：采用口服免疫方法，将硬颗粒饲料用泥鳅霍乱弧菌疫苗浸泡后投喂，每天鱼体摄入灭活菌体量为3.2×106cells/g体重，连续投喂一周，隔周后再按前述方法进行加强免疫一周。
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