[发明专利]一种H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法无效
| 申请号： | 201010293705.9 | 申请日： | 2010-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN101947317A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 朱丹丹;陶攀;璩骁;潘兹书 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | A61K39/145 | 分类号： | A61K39/145;C12N7/01;A61P31/16;C12R1/93 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 430072*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 h5n1 禽流感 病毒 颗粒 疫苗 规模化 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于依次包括如下步骤：
1）重组质粒rbacmid/HANAM1的构建和提取；
2）将重组质粒rbacmid/HANAM1转染Sf9昆虫细胞拯救重组杆状病毒，在Sf9细胞内装配病毒样颗粒；
3）规模化Sf9细胞培养、重组病毒感染和病毒样颗粒的纯化。
2.如权利要求１所述的H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于: 所述的重组质粒rbacmid/HANAM1的构建包括重组质粒pFBDM/HANAM1和pUCDM/HANAM1的构建及其在宿主菌DH10MultibacCre中重组。
3.如权利要求１或2所述的H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于: 步骤3中所述的病毒样颗粒的纯化采用离心分离技术。
4. 如权利要求1或2所述的H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于: 在Sf9细胞培养中，接种浓度为MOI=3或MOI=5。
5.如权利要求1或2所述的H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于: 在Sf9细胞培养中，增殖培养时间为72-120 h。
6.如权利要求1或2所述的H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法，其特征在于: 在Sf9细胞培养中，细胞初始接种密度为2×106细胞/ml。
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