[发明专利]一种油茶籽多肽及其制备方法有效
申请号: | 201010294593.9 | 申请日: | 2010-09-27 |
公开(公告)号: | CN102010460A | 公开(公告)日: | 2011-04-13 |
发明(设计)人: | 黄金安 | 申请(专利权)人: | 厦门盛洲植物油有限公司 |
主分类号: | C07K2/00 | 分类号: | C07K2/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C12P21/06;A61K38/02;A61P3/06;A61P9/12;A61P37/04;A61P39/00;A61P39/06 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 李雁翔 |
地址: | 361000 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 油茶 多肽 及其 制备 方法 | ||
1.一种油茶籽多肽,其特征在于:油茶籽多肽以干基计占总氮含量≥95.0%,肽含量以干基计≥90.0%,所得的相对分子质量均在4000Da以下,相对分子质量800Da以下的肽段含量≥80%,三氯乙酸氮溶解指数TCA-NSI≥95.0%,水分含量≤5.0%,灰分含量以干基计≤5.0%,粗脂肪含量以干基计≤1.0%。
2.一种制备油茶籽多肽的方法,包括如下步骤:
(1)将油茶籽饼粕粉碎,并用溶剂去除饼粕的油脂;
(2)采用碱溶酸沉方法提取分离油茶籽饼粕里的蛋白;
(3)采用酶解方法将步骤(2)中的蛋白水解为多肽粗制液;
(4)用超滤膜过滤步骤(3)所得的多肽粗制液,收集超滤液;未透过超滤膜部分为浓缩液,将浓缩液回收至反应罐中再次水解并再次超滤,收集超滤液;
(5)超滤液在阴阳离子交换树脂洗脱,得油茶籽多肽液。
3.如权利要求2所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,步骤(5)之后,还包括步骤(6):油茶籽多肽液经浓缩之后,喷雾干燥或冷冻干燥制成干粉。
4.如权利要求2或3所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,所述的油茶籽饼粕为冷榨法制油后的油茶籽饼粕。
5.如权利要求2或3所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于:所述的步骤(1)的方法为:将油茶籽饼粕碎,过40~120目筛,用95%正己烷溶剂在40~50℃条件下浸提2~3次,每次2~3h,浸提后晾晒至正己烷试剂完全挥发,待用。
6.如权利要求2或3所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,所述的步骤(2)的方法为:
(a)将步骤(1)的去除油脂后的油茶籽饼粕按1∶5~1∶10(W/V)溶解至水中,加热至45~55℃,用碱调节pH至8.0~10.0,不停搅拌15min,之后3 000~4 000r/min,15min离心取上清液;
(b)将步骤a的上清液加热至70~90℃,用酸调节pH至3.0~5.0,不停搅拌10min,之后再3 000~4 000r/min,15min,离心收集沉淀。
7.如权利要求6所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,步骤(3)所述的方法为:
(a)将步骤(2)的沉淀按1∶10~1∶20溶解至水中,加热至90~100℃,保持15~30min,然后冷却至40~50℃,加入碱性蛋白酶Alcalase 70~80AU/Kg蛋白,用NaOH试剂调节并保持pH在7.5~9.0,酶解2~4h,酶解过程中不断搅拌;
(b)待酶解结束后,迅速加热至90~95℃,并保持10~20min,之后3 000~5000r/min,15min,离心取上清液,该上清液即为油茶籽多肽粗制液。
8.如权利要求7所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,步骤(4)所述的方法为:
将步骤(3)中的油茶籽多肽粗制液注入储槽中,调节至一个固定的流速,溶液经微滤后通过分子量截留量为3 000~5 000Da超滤膜,溶液中的小分子物质经中空纤维膜的内壁渗透出来成为超滤液,收集超滤液;溶液中的蛋白等大分子物质得以保留并得到浓缩,将浓缩液回收至反应罐中再次水解。
9.如权利要求8所述的制备油茶籽多肽的方法,其特征在于,步骤(5)所述的方法为:
去离子交换树脂于水中浸泡处理24小时后装柱,然后分别用7.5%盐酸或10%NaOH对其进行处理,转化为H+型阳离子交换树脂和OH-型阴离子交换树脂,再用水清洗至微酸性或微碱性待用;
将步骤(4)中所得的油茶籽多肽超滤液,以5~10倍柱体积/h的流速通过H+型阳离子交换树脂来脱除阳离子,待流出液pH=4.0左右时停止加样,之后将此流出液以同样流速通过OH-型阴离子交换树脂来脱除阴离子,至流出液呈弱酸性时停止加样。
10.一种如权利要求1所述的油茶籽多肽的用途,其特征在于,所述的油茶籽多肽用于制备抗氧化的组合物;或用于制备降低胆固醇的组合物;或用于制备抗疲劳的组合物;或用于制备降血压的组合物;或用于制备提高机体免疫力的组合物。
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