[发明专利]一种从土茯苓中提取落新妇苷的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种从土茯苓中提取落新妇苷的方法，尤其是一种水提酸沉、大孔树脂分离、重结晶提纯落新妇苷的方法。

背景技术：

土茯苓系百合科菝莫属植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb的干燥根茎，具有除湿、解毒、通利关节之功能。土茯苓和其提取物的主要有效成分为皂苷和黄酮类化合物。据报道，土茯苓水提物有明显的抗炎作用，从土茯苓中提取分离的落新妇苷具有明显的利尿及镇痛作用。

落新妇苷(astilbin)是1950年由Kozo Hayashi和Kazuhiko Ouchi首次从植物落新妇中提取得到的化合物，据文献报道，落新妇苷具有多种显著的生物学活性，包括抑制辅酶A还原酶，抑制醛糖还原酶，保护肝脏，镇痛，抗水肿等。近年又来有报道称落新妇苷有显著的选择性免疫抑制作用，且它的选择性作用与以往的免疫抑制剂相比具有明显优势，因此可以作为一种新的免疫抑制剂用于免疫相关疾病的治疗。据报道，落新妇苷在土茯苓药材中含量在0.08-0.53％。(李磊等《HPLC法测定土茯苓药材中落新妇苷和白藜芦醇的含量》)

别名：花旗松素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷

分子量：450.408

分子式：C₂₁H₂₂O₁₁

分子结构：

成分分类：黄酮苷类

理化性质：无色结晶，熔点180℃，易溶于沸水，几乎不溶于乙醚。对光热不稳定，长时间在暴露在空气中，纯度会有所降低。

有关植物中提取落新妇苷的报道较少，多数工艺作为总苷的一部分提取出来，专属性不强，如公开号CN101524458的中国专利“土茯苓皂甙、黄酮类提取物及其制备方法”用醇提萃取的方法只得到黄酮皂苷混合物，公开号CN101732540A的中国专利“测定土茯苓乙醇水溶液提取物中的总苷有效成分的方法”通过醇提、硅胶层析的方法得到了苷类物质，但落新妇苷含量较低；有些只研究了部分提纯方法，还不能构成完整的工艺，如王晋黄等《土茯苓中提取总黄酮的工艺研究》；还有许多来源于测定方法，无法用于生产，如陈幸等《HPLC法测定土茯苓中落新妇苷的含量》、张笑颜等《高效液相色谱法测定不同产地土茯苓药材中落新妇苷的含量》等。

公开号CN1724552“一种落新妇苷的制备方法”阐述了大孔吸附树脂以及聚酰胺对落新妇苷的分离方法，对本工艺设计有借鉴意义，然而其中渗漉提取后携带的杂质较多，使后续步骤中的有机溶剂用量增多，带来生产成本的升高和环境负担的加重。经过反复实验改进后，设计对土茯苓中落新妇苷的提纯方法如下。

发明内容：

发明人经工艺优化试验，发明了一种从土茯苓中提取落新妇苷的方法。该工艺简单易操作，生产时间短，产品收率高，生产成本低。

本发明是采用以下技术方案实现的：

一种从土茯苓中提取落新妇苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)水提：将干燥土茯苓粉碎至20-30目，水中回流提取，合并提取液真空浓缩，得浓缩液；

2)酸沉：上述浓缩液趁热加2-4％氯化钠搅拌，加酸酸化至pH1-2，使黄酮类物质沉淀，滤出沉淀，滤液加水稀释，再次过滤，合并滤饼；

3)脱脂：将滤饼用2-3倍量乙酸乙酯(V/W)洗涤，干燥得脱脂固体；

4)大孔树脂吸附：将脱脂固体溶解于少量浓乙醇，上大孔树脂柱饱和吸附，以水冲柱，再以10-50％的乙醇冲柱直到流出液检测出落新妇苷，换60-90％乙醇洗脱，直到流出物无落新妇苷，收集落新妇苷洗脱液，浓缩得浸膏；

5)重结晶：将浸膏溶于热水，静置冷却，结晶，重复3-5次，得到产品。

所述回流提取水的用量为原料的5-8倍(V/W)，提取2-3次，每次1-2小时。

所述提取液浓缩至原体积的1/4-6。

所述酸为盐酸。

所述大孔树脂填料可选用AB-8或HPD-400中的一种，上柱所用乙醇浓度为90-95％，用量以溶液刚好澄清为准。

所述水和乙醇洗脱的流速为2BV/h。

所述重结晶养晶时间2-3小时。

综上所述，本发明存在以下优点：

1、加酸可以使游离的落新妇苷析出，加盐能使酸沉得效果更好，该过程不需要供热，较低碳经济；

2、利用大孔树脂可以高效且低能耗地起到分离效果，且可以重复使用，较为环保；