[发明专利]转基因兔的生产方法无效
申请号: | 201010298039.8 | 申请日: | 2010-09-30 |
公开(公告)号: | CN101979585A | 公开(公告)日: | 2011-02-23 |
发明(设计)人: | 刘庆友;石德顺;陆凤花;刘玉兵 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N15/85;A01K67/027 |
代理公司: | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人: | 翁建华 |
地址: | 530004 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 生产 方法 | ||
1.一种转基因兔的生产方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)克隆Fat1基因和PGK1调控元件;
(2)将步骤(1)所得Fat1基因和PGK1调控元件用来构建Fat1基因真核表达载体;
(3)将步骤(2)所得Fat1基因真核表达载体注射到雄性兔睾丸中;
(4)对步骤(3)所得雄性兔的精子进行PCR检测,选择检测结果为阳性的雄性兔与雌性兔交配,所产仔兔经鉴定获得F1代转Fat1基因的转基因兔。
2.根据权利要求1所述的转基因兔的生产方法,其特征在于:所述Fat1基因为序列表SEQ.ID.No.1的碱基序列。
3.根据权利要求1所述的转基因兔的生产方法,其特征在于:所述克隆Fat1基因中设计合成的特异引物为:
P1:5′CTTCCGACATTGATTATTGAC3′和P2:5′GATCCACATGATAAGATAC3′。
4.根据权利要求1至3任一所述的转基因兔的生产方法,其特征在于:所述PGK1调控元件为序列表SEQ.ID.No.2的碱基序列。
5.根据权利要求4所述的转基因兔的生产方法,其特征在于:所述Fat1基因真核表达载体为pMD-PGK1-Fat1-CMV-EGFP。
6.根据权利要求5所述的转基因兔的生产方法,其特征在于:所述注射以DMSO或脂质体为转导试剂配制注射液。
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