[发明专利]野生茄子耐盐基因StNHXl植物表达载体

权利要求书

1.野生茄子耐盐基因StNHX1植物表达载体，其构建方法为：

1)野生茄子‘Torvum Vigor’中StNHX1耐盐基因的克隆：

以野生茄子‘Torvum Vigor’幼嫩叶片为材料，提取叶片总RNA，取2μg总RNA反转录cDNA，设计引物在野生茄子‘Torvum Vigor’叶片cDNA中扩增StNHX1基因：

上游引物F：5’-GCCGGATCCGCCACCATGGGGTTGGATG-3’

下游引物R：5’-CCCGAGCTCTCAATGACCACATCCTC-3’

将PCR产物连接到pMD19-T载体上，命名为pMD19-StNHX1，测序验证；

2)StNHX1基因连接至pBI121质粒：

BamH I/Sac I双酶切质粒pMD19-StNHX1回收StNHX1片段，同样双酶切pBI121质粒回收pBI121-GUS^-；将回收的两片段用T₄连接酶连接，命名为p121-GUS^--StNHX1，转化DH5α感受态细胞；

3)StNHX1基因连接至pCAMBIA1301质粒构建植物表达载体：

HindIII/EcoR I双酶切pBI121-GUS^--StNHX1回收35S prom-StNHX1-NOS term片段，同样双酶切pCAMBIA1301质粒回收其大片段；将回收的两片段用T₄连接酶连接，命名为pCAMBIA1301-StNHX1，转化DH5α感受态细胞后进行PCR和酶切验证，构建成功。

2.权利要求1所述植物表达载体pCAMBIA1301-StNHX1在提高作物的耐盐性方面的应用。