[发明专利]表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌及其疫苗的生产方法

权利要求书

1.一种表达Asia I型口蹄疫病毒VP1基因的重组布鲁氏菌，其特征在于采用非抗性筛选技术，用密码子优化的Asia I型口蹄疫病毒JS株VP1基因替代布鲁氏菌S2菌株wboA基因1-897bp之间的序列，构建了能够表达Asia I型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌rS2-JS株，该重组菌不仅能够良好地表达Asia I型VP1基因，而且使原始菌株由光滑型转变为了粗糙型，用该菌制备的疫苗免疫动物后，实现了对布鲁氏菌病和Asia I型FMD的双重免疫，其血清可用常规的凝集试验与自然感染相区分，本菌株已于2010年9月27日送交中国微生物保藏委员会普通微生物保藏中心，保藏号为：CGMCC No.4192。

2.一种表达Asia I型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌活疫苗的生产方法，其特征在于用胰大豆肉汤作为重组布鲁氏菌rS2-JS株菌疫苗制造用培养基，培养基灭菌后按培养基量的按1％～2％接入重组布鲁氏菌rS2-JS株种子菌液，37℃，按常规方法发酵培养28～38h，加入兽用生物制品常用的蔗糖明胶稳定剂，充分混匀、分装疫苗瓶中后经冷冻真空干燥，即成为重组口蹄疫Asia I型-布鲁氏菌病rS2-JS活疫苗。

3.如权利要求2所述的一种表达Asia I型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌活疫苗的生产方法，其特征在于用于布鲁氏菌S2菌株疫苗生产用培养基均可作为本发明的疫苗生产用培养基。