[发明专利]使用盐酸金刚乙胺药剂对百合脱毒培养的方法

说明书

一、技术领域

本发明使用盐酸金刚乙胺药剂对百合脱毒培养的方法，属于植物组培快繁技术和生物技术领域。

二、背景技术

百合是单子叶植物纲百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)的总称，为多年生宿根草本花卉。百合属在世界上有90余种，原产我国的约有47种，占世界总数的51％。百合栽培品种繁多，其花朵硕大，色彩丰富，花姿优美，既能作切花、盆花，又能在园林绿地中应用，且大多数百合可以食用，是上等的滋补佳品。百合素有“百年好合”之意，深受人们的喜爱。百合主要分布在中国、日本、北美和欧洲等温带地区，我国近年来的百合切花生产发展较快，在昆明、上海、深圳已形成三大生产基地。但其繁殖主要还是采用常规分球、分珠芽鳞片扦插，鳞片包埋等繁殖的方式。长期的无性繁殖使百合体内逐渐积累大量病毒致使百合患病毒病，影响百合的产量和质量。因此建立简便易行、脱毒率高的脱毒体系是减少病毒对百合的危害、恢复种性的关键问题之一。

自Stewart(1896)描述百合的坏死条纹以来，相继报道了百合的病毒病原14种。其中发生普遍，危害严重的病毒有5种，即百合潜隐病毒(Lily symptomless virus，LSV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaicvirus，CMV)、郁金香碎花病毒(Tulip breaking virus，TBV)、异名百合斑驳病毒(Lily mottle virus，LMoV)和百合丛簇病毒(Lily rosette virus，LRV)；其他9种病毒均在栽培地区极少发生，对百合生产构不成普遍危害，如百合X病毒(Lily virus X，LVX)、百合环斑病毒(Lily ring spot virus，LRSV)、水仙花病毒(Narcissus mosaicvirus，NMV)和烟草环斑病毒(Tobacco ring spot virus，TRSV)。本发明主要对百合无症病毒(Lily symptomlessvirus，LSV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)、百合斑驳病毒(Lily mottle virus，LMoV)病毒、百合丛簇病毒(Lily rosettle virus，LRV)进行检测。

开展百合脱毒研究最早是Phillips(1962年)，他利用百合茎尖培养脱毒成功以后，先后又有许多外国学者利用茎尖脱毒成功。目前国际上有几个国家利用这种方法获得百合无病毒苗，并在生产上大规模应用。茎尖脱毒培养的两个关键技术环节是茎尖的成活率和脱毒率。茎尖培养成活率低。褐化是降低茎尖培养成活率的首要因素。褐化的发生与许多因素有关，茎尖大小、取材季节、培养方式、激素浓度、基本培养基、培养基添加物都对茎尖褐化有影响，例如茎尖越小，褐化越严重，成活率越低。在茎尖培养时为抑制褐化的发生，需要优化上述各因子。应用抗氧化剂AC和VC也可有效抑制茎尖培养的褐化现象。鉴于此，本发明采用百合鳞茎作为材料进行脱毒苗的培养。