[发明专利]一种花生降血压肽及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及药品，尤其涉及一种降血压肽，同时，还涉及该降血压肽的制备方法。

技术背景：

花生是我国重要的油料作物和经济作物，年产已超过1500万吨，居世界首位。我国生产的花生大部分用于榨取食用油脂，每年榨油后能得到900万吨的花生饼粕，这些花生饼粕多被用作加工饲料或直接丢弃，没有进一步开发利用。花生饼粕中蛋白质含量达40％～50％，且花生蛋白营养价值较高。我国对花生饼粕的利用不够，花生蛋白研究开发较晚，精深加工技术相对落后，产品品种结构单一，缺乏高科技含量的深加工、高档次产品。目前，花生油冷榨法和水酶法等先进技术的出台与推广为提高蛋白得率和保存其生物活性打下基础，精深加工利用花生蛋白特别是花生蛋白水解多肽的研究已成为目前植物蛋白研究领域的新热点。

降血压肽(antihypertensiv peptide，AHP)是一类能够降低人体血压的小分子多肽。它通过抑制RAS系统的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme，ACE)活性而降低血压。目前，降血压肽是抗高血压药物研究的热点之一。

发明内容：

本发明的目的之一是提供一种降血压效果明显，无毒副作用的花生降血压肽；目的之二是提供该花生降血压肽供的制备方法。

本发明的目的之一可通过如下技术措施来实现：

该花生降血压肽含有80-96重量份的肽，0.2-3重量份的糖，0.5-5重量份的脂肪和0.5-7重量份的灰分。

本发明的目的之一还可通过如下技术措施来实现：

所述的肽中含有60-80重量份的相对分子质量小于1000Da的短肽。

本发明的目的之二可通过如下技术措施来实现：

该制备方法按如下步骤进行：

a.原料预处理：以冷榨花生饼为原料，粉碎后加水溶解，用碱调节pH至碱性，浸提，离心取上清液；以酸沉淀上清液，离心收集沉淀；

b.酶处理：取a步骤的沉淀加水溶解，然后按照碱性蛋白酶∶沉淀物水溶液＝1∶8-10重量份配比加入碱性蛋白酶，于45～48℃、pH＝7.9～8.2条件下酶解30～60min，得酶解液；

c.酶灭活：将b步骤的酶解液用酸调节pH至蛋白质等电点以下，使酶灭活，然后离心取上清液，得花生降血压肽原液；

d.超滤：将c步骤的花生降血压肽原液通过超滤膜去除大分子片段，得花生降血压肽液；

e.脱盐、干燥：将d步骤的花生降血压肽液依次通过H⁺型阳离子交换树脂和OH^-型阴离子交换树脂脱盐，滤液经浓缩、冷冻干燥，得产品。

本发明的目的之二还可通过如下技术措施来实现：

a步骤中所述的粉碎为80-100目；a步骤中所述的浸提温度为30-80℃，浸提时间为1-5小时；a步骤中所述的冷榨花生饼粉∶水＝1∶8-10重量份；所述的碱性是pH＝8-9，所述的酸沉淀上清液的pH＝4-5；c步骤中所述的pH＝4.0-4.5；d步骤中所述的超滤膜的截留分子量为3000-5000Da；e步骤中所述的通过离子交换树脂的流速为10～15倍柱体积/h；a、c步骤中所述的酸是柠檬酸。

花生降血压肽ACE抑制活性的检测方法：

高压液相色谱(HPLC)系统：Waters 2690，监测器：Waters 996；色谱柱：ZORBAXODS 4.6mm×150mm；洗脱液：30％甲醇-70％蒸馏水(含1％HAC)；流速：0.8ml/min；洗脱波长：228nm；上样量：10μl。

将本发明的花生降血压肽溶于超纯水中，离心(1×104r/min，20min)，取上清液进行ACE抑制活性测定。取本发明的花生降血压肽10μl和ACE(0.25U溶于2.5mL 0.1mol/L的硼酸盐缓冲溶液、pH＝8.3、含0.5mol/L氯化钠溶液中)5μL于37℃恒温水浴中保温6min，加入50μL 6.5mmol/L底物(马尿酰-组胺酰-亮氨酸，Hippuryl-His-L-Leu，HHL)溶于相同的缓冲液中。37℃下反应30min，加入25μl 1mol/L盐酸溶液中止反应，至室温取10μl反应产物进样，通过HPLC洗脱图谱定量马尿酸生成量，以生成马尿酸的量来判断本发明的花生降血压肽的ACE抑制活性。计算公式为：